一、细胞周期蛋白cyclin D1、CDK4在食管癌中的表达及其意义（论文文献综述）
李芳[1]（2021）在《LncRNA CASC9对人肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响》文中研究表明
刘洋[2]（2021）在《毛蕊异黄酮诱导肝癌细胞凋亡机制的研究》文中研究表明肝癌是全世界最常见的癌症之一,因其具有预后性差、较难治愈等特点,其死亡率居高不下,已严重威胁我国人民的生活质量。目前,常用手术治疗法治疗早期肝癌,使用化学治疗法治疗晚期肝癌,但这些治疗方法均具有一定的弊端。传统中药多为天然植物,因其通常具有较低的毒副作用而备受国内外专家的关注。毛蕊异黄酮是传统中药黄芪提取物之一,因其可以发挥植物雌激素活性,已被证实可以抑制卵巢癌细胞增殖,并具有抗炎,抗骨质疏松等多种生物活性。本实验利用Hep G2细胞系作为研究模型,探讨毛蕊异黄酮对肝癌细胞可行的抗癌机制,为开发治疗肝癌新型策略以及其他癌症治疗提供理论依据。通过CCK-8实验对三种正常细胞以及三种肝癌细胞分析毛蕊异黄酮的杀伤作用和毒副作用。利用荧光双染实验、流式细胞术实验、JC-1实验以及western blot实验检测是否通过线粒体凋亡途径及相关蛋白的变化情况。通过流式细胞术实验及western blot实验,从细胞及分子水平上检测细胞周期阻滞情况。利用western blot实验分析所激活的上游蛋白途径并判断它们之间的关系。利用活性氧检测试剂盒和活性氧清除剂NAC分析细胞内活性氧对Hep G2细胞的凋亡作用。利用细胞划痕实验和NAC试剂分析毛蕊异黄酮处理后细胞迁移情况及活性氧对细胞迁移的影响。与5-FU相比,毛蕊异黄酮对三种肝癌细胞均具有较强的杀伤作用,并对肝、肺和胃正常细胞具有较低的毒副作用;毛蕊异黄酮处理Hep G2细胞后,细胞凋亡数量明显上升,线粒体膜电位下降,线粒体相关蛋白也发生相应的变化,毛蕊异黄酮通过MAPK、STAT3、NF-κB信号通路Hep G2细胞凋亡;毛蕊异黄酮可以通过活性氧调控的AKT信号通路,使Hep G2细胞阻滞在G0/G1期,G0/G1期相关蛋白也发生相应的变化。通过活性氧调控的TGF-β信号通路抑制细胞迁移。综上,毛蕊异黄酮对肝癌细胞具有良好的杀伤作用,可以通过活性氧调控的MAPK、STAT3、NF-κB信号通路,导致肝癌Hep G2细胞发生凋亡,通过调控AKT信号通路诱使细胞周期阻滞,调控TGF-β信号通路抑制细胞迁移。
吴赛男[3]（2021）在《五味子乙素对人宫颈癌Siha细胞增殖和迁移的影响及机制研究》文中研究说明目的:宫颈癌是一种多发且常见的妇科生殖系统恶性肿瘤,直接严重损害和危及女性的身体健康。宫颈癌发生的原因是自身及社会外界等各种各样的因素共同作用所致。时至今日并没有研制出能够有效对抗宫颈癌的特异性药物。北五味子是我国的一种传统中药,在抗炎、抗氧化、抑制多药耐药以及抗肿瘤活性等方面发挥作用。五味子乙素（schisandrin B,Sch B）是五味子中具有多种作用和功效的活性成分之一。目前在五味子乙素抑制宫颈鳞癌Siha细胞的作用及其机制方面研究较少。本研究旨在探索五味子乙素对人宫颈癌Siha细胞增殖和迁移的作用及其机制,以期为中药发挥抗肿瘤作用的研究提供依据。方法:利用GEO（Gene Expression Omnibus）数据库中芯片表达数据对已筛选出的宫颈癌和正常宫颈组织的差异基因进行汇总分析。根据筛选结果分别进行KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）和GO（Gene Ontology）富集通路综合分析。通过The Human Protein Atlas数据库进行PKM2的基因表达谱分析。取对数生长期的Siha细胞,分为空白对照组和不同浓度五味子乙素处理组,其中空白对照组为不做任何处理组。采用MTT比色法测定经不同浓度组五味子乙素处理Siha细胞后对其生长增殖的抑制作用;划痕实验法检测五味子乙素对Siha细胞迁移所带来的影响;Real-time PCR和Western blot法检测五味子乙素作用于Siha细胞后丙酮酸激酶2（PKM2）,信号转导和转录活化因子3（signal transducers and activators of transcription,STAT3）,细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）,凋亡相关蛋白BCL-xl,转移相关蛋白MMP-2（基质金属蛋白酶2）和MMP-9（基质金属蛋白酶9）的m RNA转录和蛋白表达情况;用葡萄糖和乳酸含量测定的方法检测五味子乙素处理48h后的Siha细胞葡萄糖摄取量和乳酸生成含量。结果:结果显示通过筛选得到了2382个差异表达的基因,上调表达的基因中包括PKM基因。在KEGG富集通路中,上调基因富集到21条通路,下调基因富集到11条通路。基因表达谱分析结果显示宫颈鳞癌Siha细胞中PKM2基因相较于正常宫颈中的PKM2为高表达。MTT结果显示经五味子乙素处理48h后,Siha细胞恶性增殖被抑制,且抑制效果随药物浓度增大而逐渐增强（25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L均P<0.05）;划痕实验结果显示,五味子乙素处理Siha细胞48h后,降低了Siha细胞的迁移能力。药物浓度越高,迁移率越低。高浓度组迁移差异显着（P<0.01）;Western blot结果显示,与未加药组相比,药物作用后能够抑制STAT3,PKM2,Cyclin D1,BCL-xl（低、中、高浓度组均P<0.05）,MMP-2（中、高浓度组P<0.05）,MMP-9（中、高浓度组P<0.05）蛋白相对表达水平下调;Real-time PCR结果显示,与未加药组相比,不同浓度加药组的STAT3,PKM2,Cyclin D1,BCL-xl,MMP-2,MMP-9的m RNA水平均有不同水平下降。结论:生物信息学分析表明宫颈癌的发生和发展可能与PKM基因有一定程度的关联性。五味子乙素对HPV16阳性的宫颈鳞癌Siha细胞的增殖和迁移有抑制作用。五味子乙素发挥作用的这种机制可能是通过下调糖酵解途径中PKM2的水平从而直接影响了STAT3的磷酸化,降低其下游影响周期的靶蛋白Cyclin D1和抗凋亡蛋白BCL-xl的表达来发挥作用以抑制细胞生长和繁殖,通过下调MMP-2和MMP-9的表达而减少细胞外基质的降解来减弱细胞迁移能力从而发挥抗癌作用。
程婧,倪月莉,AGBANA Yannick Luther,云芳,杨晖,赵雷,李小渝,张雪丹,张巧,杨哲,况应敏,朱月春[4]（2021）在《乙酰辅酶A羧化酶1通过调控CyclinD1/CDK4影响肾透明细胞癌细胞增殖》文中认为乙酰辅酶A羧化酶1（acetyl-CoA carboxylase1,ACC1）是脂肪酸合成途径的限速酶。ACC1与多种代谢性疾病和癌症密切相关。然而,ACC1在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma, ccRCC）中的作用及机制却未见报道。本研究以肾透明细胞癌786-O和Caki-1细胞为对象,探讨ACC1异常表达对肾透明细胞癌增殖的影响及其作用机制。首先通过红油-O-染色发现,相比HK2（human kidney-2）细胞,786-O和Caki-1细胞中的脂肪含量明显增加。检索TCGA数据库分析发现,ACC1的蛋白质水平在肾透明细胞癌组织中的表达显着高于正常肾组织（P<0.001）。由分期分级分析发现,临床TNM各期的ACC1蛋白表达均显着高于正常组织。且ACC1表达水平越高,病理分级越高。而ACC1的mRNA水平高表达与肾透明细胞癌病人的不良预后呈正相关。Western印迹结果显示,与对照组HK2细胞相比,在786-O和Caki-1细胞中,ACC1的表达明显增加。通过慢病毒载体构建ACC1敲低的稳转细胞株,由红油-O-染色结果显示,ACC1敲低可显着降低786-O和Caki-1细胞的脂肪含量。CCK-8和平板克隆结果显示,ACC1低表达可显着降低786-O和Caki-1细胞的增殖和克隆形成能力。流式细胞周期结果显示,ACC1敲低可使细胞周期G0/G1期阻滞,并且抑制细胞周期蛋白D1（cyclinD1）和CDK4表达。以上结果表明,ACC1在肾透明细胞癌中异常高表达,并通过上调细胞周期蛋白D1和CDK4表达调控细胞周期进程,促进肿瘤增殖,提示不良预后,ACC1有望成为ccRCC干预治疗的潜在新靶点。
侯晗琦[5]（2021）在《MiR-99a调控猪颗粒细胞增殖凋亡的作用机制研究》文中认为MicroRNA（miRNA）是一类长度在19-25 nt之间的短链非编码RNA,广泛存在于动物的各种组织细胞,通过调控转录和翻译参与动物的生理与病理过程调控。miR-99a是一种在癌症组织低表达而在卵巢组织高表达的miRNA,与卵泡闭锁过程中的颗粒细胞凋亡有关,但在猪卵泡发育过程中的调控作用研究较少。为此,本研究检测了miR-99a在不同闭锁程度猪卵泡中的表达情况,并对其影响猪颗粒细胞增殖和凋亡的作用与机制进行了研究。结果发现,早期闭锁卵泡中的miR-99a表达水平高于健康卵泡和晚期闭锁卵泡。在HEK-293T细胞中采用双荧光素酶报告实验验证了m TOR是miR-99a直接的靶基因。传代培养三代的猪颗粒细胞转染50 n M的miR-99a的Mimics 48小时后,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡水平上升,细胞周期阻滞在S期。与空白对照组相比,细胞周期蛋白基因Cyclin B、Cyclin D的表达显着下调（P<0.05）,细胞周期蛋白依赖性激酶基因CDK1、CDK4的表达极显着上调（P<0.01）,自噬相关基因ATG13和促凋亡基因BAD与BAX的表达显着上调（P<0.05）,抑凋亡基因BCL-2和促凋亡基因TP53的表达变化不显着（P>0.05）。m TOR信号通路中的m TOR基因表达量极显着下调（P<0.01）、AKT及AKT1表达量显着下调（P<0.05）,m TOR蛋白表达水平降低。猪颗粒细胞转染100 n M的miR-99a Inhibitors 48小时后,细胞周期与细胞凋亡无明显变化。与空白对照组相比,CDK1、CDK4、Cyclin D、Cyclin B、BAD、BCL-2、TP53、ATG13、AKT和AKT1的表达无显着变化（P>0.05）,BAX的表达显着上调（P<0.05）,m TOR基因表达极显着上调（P<0.01）,但m TOR蛋白表达水平无明显变化。上述结果表明,miR-99a具有抑制猪颗粒细胞增殖和促进猪颗粒细胞凋亡的作用,这一作用可能是通过抑制其靶向基因m TOR表达,进而下调AKT信号通路相关基因表达、上调凋亡相关基因和自噬相关基因表达实现的。
王惠[6]（2021）在《新疆哈密哈萨克族食管癌病理特点及治疗预后的影响因素》文中研究表明背景食管癌为人类常见恶性肿瘤之一,而新疆哈萨克族中食管癌发生率也有较多报道,本地区多以游牧为生,文化程度低,家庭生活水平较差,日常饮食单一,营养物质摄入不足,有较高的食管癌发生风险。了解哈萨克族食管癌的病理特征,对于判断疾病发生发展至关重要,对于完善分子病理学理论进行早期诊断,预测食管癌患者的疗效和预后有重要意义。目的分析新疆哈密哈萨克族食管癌的病理特点,并采用门诊、住院复查及电话等方式跟踪调查,获得预后资料,分析治疗预后影响因素。方法选取2012年12月～2017年12月哈密市第二人民医院收治的新疆哈萨克族食管癌患者72例,统计所有患者临床资料,分析食管癌的病理特点,同时记录其术前实验室指标、影像学资料及治疗情况。采用门诊、住院复查及通过电话和其他随访方法获得预后数据。术后3年内3月随访一次,到患者死亡日期为总的存活时间,至2020年年底。以寿命表法对术后1年、2年、3年生存率进行计算,Kaplan-Meier法分析累积生存率,并绘制生存曲线。将随访截止死亡的患者记为死亡组,存活者（除外失访病例）记为生存组,比较两组的临床资料,采用单因素法分析新疆哈萨克族食管癌预后的相关因素,多因素Logistics回归法分析影响哈萨克族食管癌预后的独立因素。结果1.新疆哈萨克族食管癌的术前资料72例食管癌患者,术前纤维蛋白原（FIB）升高19例、血小板计数（PLT）升高15例、D-二聚体升高23例、血脂水平升高35例、预后营养指数（PNI）低26例,磁共振成像显示T1WI轴位围绕管腔不均匀增厚,腔内狭窄不规整,T2WI环状高密度黏膜线不连续,DWI影像见肿物呈高密度,表观扩散系数（ADC）上可见低密度,ADC值范围为1.12～1.86×10-3mm2/s。2.新疆哈萨克族食管癌的治疗情况行Lvor-lewis手术37例,经Mckeown手术35例,经现代二野或二野半淋巴结清扫清除胸腔内、腹腔与颈部两侧的淋巴结群。单纯接受手术治疗43例,术后予以辅助放化疗29例,适形调强放疗方案:1.8 Gy/次,1次/d,5次/周,共28次。化疗方案（均28天一周期）（1）:紫杉醇+顺铂/奈达铂,放疗时2周期,同步放化疗后2周期。化疗方案（2）:顺铂+氟尿嘧啶,放疗时2周期,同步放化疗后2周期。术后免疫组织化学染色可见ki-67、EGFR、Cyclin D1阳性表达分别46例、38例、59例。3.总生存时间分析以寿命表法评估随访所得72例食管癌术后患者的数据,在3年随访结束,共17例死亡,55例存活,其中4例未达随访终点,51例在随访结束时仍存活。食管鳞癌术后平均生存时间为30.57个月,均未达中位生存,其1年、2年、3年累积生存率分别为89.42%、79.26%、62.50%。4.新疆哈萨克族食管癌的病理特点72例新疆哈萨克族食管癌患者中,男46例,女26例,年龄41～72岁,平均（57.38±7.03）岁,肿瘤直径（3.91±0.74）cm,体质指数（BMI）（23.73±2.55）kg/m2,83.33%（60/72）的患者年龄<65岁,且有吸烟饮酒史、病变集中在食管中下段、肿瘤直径≤5 cm、组织学分型多为溃疡型、病理分型为鳞癌、低中分化、神经侵犯、淋巴结转移、脉管瘤栓、TNM分期以Ⅱ～Ⅲ期为主是其主要病理特征。5.影响新疆哈萨克族食管癌治疗预后的因素分析多因素Logistics回归分析发现,年龄、饮酒史、肿瘤直径>5 cm、低分化、神经侵犯、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、食管憩室、术前FIB升高是影响食管癌预后独立影响因素,而PNI、术后辅助治疗为保护性因素（P<0.05）。结论新疆哈萨克族食管癌患者以鳞癌、低中分化、神经侵犯、淋巴结转移、脉管瘤栓、TNM分期以Ⅲ～Ⅳ期为主是其主要病理特征;年龄、饮酒史、肿块直径>5 cm、低分化、神经侵犯、有淋巴结转移、TNM分期、食管憩室、术前FIB为影响新疆哈萨克族食管癌患者治疗预后的独立影响因素。
王阳[7]（2020）在《FGFR-2基因多态性以及作为microRNA-494的靶基因与乳腺癌的相关性研究》文中认为研究背景乳腺癌（breast cancer,BC）是世界范围内女性最常见的癌症。BC是一种复杂的异质性疾病,根据组织学特征可分为激素受体阳性、人表皮生长因子受体2 阳性（human epidermal growth factor receptor-2 overexpressing,HER2+）和三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）。诱发BC的因素具有多样性,如人工流产、用枸橼酸氯米芬和促性腺激素等诱导排卵、电离辐射以及酗酒和吸烟等。由于女性对乳房的自我检查和临床检查的疏忽,乳腺癌很难在早期被发现,从而耽误患者的及时治疗。因此,通过早期检查改善BC的预后和提高生存率仍然是BC治疗的重中之重。深入探究BC的风险因子以及其内在发病机制,对于BC的预防及治疗具有深远的意义。研究目的本研究旨在探究miR-494通过介导成纤维细胞生长因子受体-2（fibroblast growth factor receptor-2,FGFR-2）对BC细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭方面的影响。实验首先探讨 FGFR-2和磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α（phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha,PI3KCA）基因变异在BC中的意义及其与预后之间的关系。随后通过对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的研究,检测miR-494过表达或沉默对乳腺癌细胞MDA-MB-453和MCF-7细胞行为的影响。以miR-494和FGFR-2之间的调控关系为切入点,深入探究miR-494对BC细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,对细胞凋亡的促进作用,以及对 RAS/RAF/裂原活化蛋白激酶激酶（mitogen-activated protein kinase kinase,MEK）/细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）信号通路和磷脂酰肌醇激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶 B（protein kinase B,AKT）信号通路的抑制作用。试图阐释miR-494通过介导FGFR-2对BC产生调控作用的分子机制,以期为BC的治疗提供有力的理论支持和方案策略。研究方法第一部分中国人群中FGFR-2和PI3KCA基因变异与乳腺癌风险的关系本部分实验中,首先通过对328名BC患者和389名健康对照组进行了基因分型。随后,我们评估FGFR-2 rs1219648和PI3KCA rs6443624与BC易感性和临床病理特征的相关性,包括年龄、肿瘤大小、临床分期、分级、淋巴结浸润状态、雌激素受体（estrogen receptor,ER）、孕激素受体（progesterone receptor,PR）以及HER2基因状态。采用log-rank检验Kaplan-Meier曲线评估FGFR-2 rs1219648和PI3KCA rs6443624与预后指标之间的相关性,以此阐述这些基因与中国女性BC患者风险和患者生存率之间的关系。在本部分实验中,采用DNA提取试剂盒提取基因组DNA,进行基因分型。第二部分过表达或沉默miR-494对乳腺癌细胞MDA-MB-453和MCF-7细胞行为的影响本部分实验中,首先对 MCF-10A、SK-BR-3、MDA-MB-231、MDA-MB-453、BT-549以及MCF-7等BC细胞系及BC组织中的miR-494的表达水平进行检测,根据表达水平选择MDA-MB-453和MCF-7细胞用于后续实验。随后,我们在所选的细胞中过表达或沉默miR-494,利用细胞活力以及细胞周期相关因子CyclinD1、细胞周期素依赖激酶（Cyclin Dependent Kinase,CDK）4 和 CDK6的表达,检测细胞增殖;利用细胞凋亡率以及凋亡相关因子pro-Caspase 3、Cleaved-Caspase 3和Bax的蛋白表达量,检测细胞凋亡;利用细胞迁移率、侵袭率以及相关因子基质金属蛋白酶9（Matrix Metallopeptidase 9,MMP-9）和Vimentin的蛋白表达量,检测细胞迁移和侵袭。本部分的研究中,使用qRT-PCR检测BC细胞系中miR-494表达情况;使用CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit-8,CCK-8）检测细胞活力;使用lipofectamine 3000试剂进行细胞转染;使用碘化丙酯（propidium iodide,PI）和荧光素异硫氰酸酯（fluorescein isothiocynate,FITC）偶联Annexin V染色检测细胞凋亡率;使用双室迁移法检测细胞迁移和侵袭;使用蛋白免疫印迹分析检测CyclinDI、CDK4、CDK6、pro-Caspase 3、Cleaved-Caspase 3、Bax、MMP-9、Vimentin 和 β-actin 的蛋白表达。第三部分miR-494靶向FGFR-2基因抑制MDA-MB-453和MCF-7细胞行为本部分实验中,首先将miR-494 mimic或其阴性对照（negative control,NC）mimic转染至MDA-MB-453和MCF-7细胞,转染48h后检测细胞中FGFR-2的表达变化。利用双荧光素酶报告实验,检测miR-494对FGFR-2的靶向调控关系。分别用 NC mimic 和 pEX-2、miR-494 mimic 和 pEX-2 以及 miR-494 mimic 和pEX-FGFR-2共转染至MDA-MB-453和MCF-7细胞,测定细胞活力、细胞凋亡率、细胞迁移率、细胞侵袭率、细胞周期相关因子CyclinDl、CDK4和CDK6的表达变化、细胞凋亡相关因子pro-Caspase 3、Cleaved-Caspase 3和Bax的表达变化、细胞迁移和侵袭相关因子MMP-9和Vimentin的表达变化,以探究miR-494通过调控FGFR-2表达影响BC细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。最后检测RAS/RAF/MEK/ERK 信号通路核心因子（RAS、RAF、p/t-MEK 以及 p/t-ERK）以及PI3K/AKT信号通路核心因子（p/t-PI3K和p/t-AKT）的蛋白表达情况,以探究miR-494通过调控FGFR-2表达,影响BC细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的分子机制。本部分的研究中,利用双荧光素酶报告实验,检测FGFR-2是否为miR-494的靶基因;使用CCK-8法检测细胞活力;使用lipofectamine 3000试剂进行细胞转染;使用FITC-膜联蛋白V/PI检测试剂盒检测细胞凋亡率;使用双室迁移法检测细胞迁移和侵袭:使用蛋白免疫印迹分析检测FGFR-2、CyclinD1、CDK4、CDK6、pro-Caspase 3、Cleaved-Caspase 3、Bax、MMP-9、Vimentin、和β-actin的蛋白表达。结果第一部分中国人群中FGFR-2和PI3KCA基因变异与乳腺癌风险的关系本部分实验发现,FGFR-2 rs1219648,AG等位基因与BC患者临床分期和分级均表现出显着的相关性,GG等位基因与BC患者分级显着相关。同时发现FGFR-2 rs1219648优势模型也显示与BC患者临床分级显着相关。对于PI3KCA rs6443624,其AC等位基因与临床分期显着相关,并且AA等位基因与分级显着相关。此外,PI3KCA rs6443624优势模型与临床分期显着相关。FGFR-2 rs1219648或PI3KCA rs6443624在BC患者中的预后影响检测显示,相对于FGFR-2 rs 1219648 AA等位基因的患者,AG和GG等位基因的患者生存时间更短。然而,患者PI3KCA rs6443624中显示每个等位基因之间都没有差异。除此之外,我们采用逐步Cox回归模型进行多变量分析,发现临床分期、ER和PR状态可能是重要的预后指标。第二部分过表达或沉默miR-494对乳腺癌细胞MDA-MB-453和MCF-7细胞行为的影响本部分实验发现,miR-494 在 MCF-10A、SK-BR-3、MDA-MB-231、MDA-MB-453、BT-549以及MCF-7等BC细胞系及BC组织中,呈现低表达。由于实验中MDA-MB-453和MCF-7细胞中miR-494的表达量较其它细胞更低,因此选择MDA-MB-453和MCF-7细胞用于后续实验。随后我们在所选的细胞中过表达miR-494,发现miR-494过表达能够降低MDA-MB-453和MCF-7细胞的活力、增殖,并且降低细胞周期相关因子CyclinD1、CDK4和CDK6的表达;提高细胞凋亡率进而促进细胞凋亡,并且提高凋亡相关因子Cleaved-Caspase 3和Bax的蛋白表达量;降低细胞迁移率、侵袭率,并降低细胞迁移和侵袭相关因子MMP-9和Vimentin的蛋白表达。此外,实验结果显示:miR-494沉默能够提高MDA-MB-453和MCF-7细胞活力、增殖,并且促进细胞周期相关因子CyclinD 1、CDK4和CDK6的表达;对细胞凋亡影响不是很明显;促进细胞迁移率、侵袭率并促进细胞迁移和侵袭相关因子MMP-9和Vimentin的蛋白表达。第三部分miR-494靶向FGFR-2基因抑制MDA-MB-453和MCF-7细胞行为实验结果显示,miR-494过表达可以抑制MDA-MB-453和MCF-7细胞中FGFR-2的表达;双荧光素酶报告实验结果证实,FGFR-2是miR-494的一个靶基因;FGFR-2过表达能够促进MDA-MB-453和MCF-7细胞活力、细胞迁移率以及侵袭率,上调细胞周期相关因子（CyclinD1、CDK4和CDK6）、细胞迁移和侵袭相关因子MMP-9和Vimentin的蛋白表达;降低细胞凋亡率以及下调细胞凋亡相关因子（c/p-Caspase 3和Bax）的表达。此外,miR-494过表达能够下调MDA-MB-453和MCF-7细胞中RAS/RAF/MEK/ERK信号通路核心因子（RAS、RAF、p/t-MEK以及p/t-ERK）以及PI3K/AKT信号通路核心因子（p/t-P13K和p/t-AKT）的蛋白表达情况,而FGFR-2过表达能够逆转该趋势。结论本课题对miR-494通过调控FGFR-2表达抑制BC细胞的增殖、迁移、侵袭以及促进细胞凋亡的作用及分子机制进行系统的研究,得出以下结论:（1）在中国人群中,FGFR-2 rs1219648 和 PI3KCA rs6443624 均与 BC 风险性相关;FGFR-2 rs1219648和PI3KCA rs6443624的单核苷酸多态性可能有助于BC高危患者的鉴别,并可能是中国人群BC的潜在预后因素。（2）miR-494过表达能够抑制MDA-MB-453和MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡;miR-494沉默能够提高MDA-MB-453和MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭,对细胞凋亡影响不明显。（3）miR-494能够抑制FGFR-2表达,FGFR-2是miR-494的一个靶基因。（4）miR-494过表达通过调控FGFR-2抑制BC细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。（5）miR-494能够通过调控FGFR-2的表达抑制RAS/RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路。
张宇博[8]（2020）在《PFTK1在直肠癌中的表达及临床相关性研究》文中认为背景:（1）最常见恶性肿瘤中,结直肠癌位居其中,位于我国肿瘤死亡人数的第五位,并且随着社会发展和人们饮食习惯的改变,直肠癌的发病率在我国呈明显上升趋势,在过去的20年中,直肠癌的诊疗方法有了极大的进步,但是患者的复发及死亡率并无明显改善,因此对于直肠癌的发生发展机制以及潜在的分子治疗的相关研究成为新的热点。（2）PFTK1基因于1997年第一次被发现存在于小鼠神经系统内,2001年人类He La细胞文库中同样发现了PFTK1基因,是周期蛋白依赖性激酶家族的一员,PTFK1作为新发现的基因被发现可以调节真核细胞的分化,增殖以及细胞周期的转换。既往的研究显示,PTFK1在胃癌,乳腺癌,食管癌等多种肿瘤细胞中存在高表达现象,但基本未见关于PFTK1在直肠癌中是否存在高表达的研究。目的:主要研究直肠癌中PFTK1表达情况,比较与患者的各临床因素是否具有相关性,进而评估其对直肠恶性肿瘤发生发展演变以及临床症状,治疗,预后中的作用,为直肠癌的诊疗提供新的方向。方法:回顾性收集安徽医科大学第二附属医院医院2017年1月到2018年8月手术切除并明确诊断为直肠癌的56例石蜡玻片标本,所有患者术前均未接受过放疗,化疗及其他相关治疗,每例标本分别取直肠癌组织,对应癌旁组织进行免疫组织化学以评估PFTK1蛋白的表达情况,在我院资深病理师的协助下对表达情况进行分评分分组,同时通过病案系统收集患者的性别,年龄,病理类型,T,N,M分期,淋巴结是否转移,肿瘤直径,临床分期,术前CE-A水平等相关临床资料。使用SPSS22.0统计软件比较样本,通过X2检验方法计算结果与临床资料,并分析与临床因素相关性。通过ROC曲线分析PFTK1在直肠癌诊断中的辅助价值。通过Kaplan-Meier总体生存分析PFTK1表达情况和术后生存时间的相关关系。结果:（1）在56例直肠癌组织中有40例癌组织PFTK1表达明显升高,占比为71.4%（40/56）,而在56例癌旁组织中有18例癌旁组织PFTK1表达明显升高,占比为32.1%（18/56）。（2）通过X2检验方法比较得出PFTK1的高表达与直肠癌临床分期,T分期,术前CEA水平及淋巴结是否转移有明显相关性（P<0.05）,与性别,年龄,病理类型,N,M分期,肿瘤直径,术后存活时间无明显相关性（P>0.05）。结论:PFTK1在人直肠癌中表达明显升高,并且PFTK1的高表达与直肠癌的临床分期,T分期及淋巴结转移等因素的相关性具有统计学意义,参与直肠癌的发生发展,可能与直肠癌的侵袭转移相关。
谢波[9]（2020）在《HGF通过激活PI3K/AKT信号通路促进食管鳞癌发生和发展机制的研究》文中提出背景食管癌是全球第八大最常见的恶性肿瘤,死亡率在所有类型的肿瘤中排在第六位,且发生率因地域而异。食管癌主要分为鳞状细胞癌（Esophagus Squamous Cell Carcinoma,ESCC）和腺癌。中国是食管癌的高发地区,90%以上的食管癌是ESCC。由于食管癌早期症状不明显,大多数患者在确诊时都已经是中晚期,已经发生淋巴转移和组织浸润,这也是食管癌患者预后不佳的主要原因。尽管在食管癌综合治疗方面取得了一定的进展,但总体存活率仍然很低,五年存活率仅为15-34%。到目前为止,影响食管癌的发展及预后的因素仍然不清楚。因此,寻找食管癌发病和进展的关键分子,完善食管癌发生和发展的分子机理,为食管癌的诊断和治疗提供新的靶点和方向,寻找出食管癌诊断、治疗以及预后的的生物标志物仍然是迫切需要的,对于临床诊断、提供治疗策略具有重大意义。肝细胞生长因子/c-间叶-上皮转化受体酪氨酸激酶（Hepatocyte Growth Factor/c-mesenchymal-epithelial transition receptor tyrosine kinase,HGF/c-MET RTK）信号通路在正常组织中处于失活状态,而在多种类型的恶性肿瘤中则异常激活。相关研究证实抑制HGF/c-MET信号通路可以作为治疗多种癌症类型的有效策略,如非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）肝癌、胃癌、结直肠癌、卵巢癌、膀胱癌、头颈癌、子宫内膜癌等。但是HGF在食管鳞癌中的作用少见报道,我们在前期的工作中发现HGF作为一种多功能的细胞因子,在ESCC中与cyclin E协同高表达,且与ESCC的分化程度、TNM分期密切有关,影响着患者的预后。因此为了研究HGF对ESCC发生和发展的影响及其参与的具体分子机理,从而为临床诊断、治疗ESCC提供新的靶点。本研究主要通过分子信息学研究和体内外实验来探讨HGF对ESCC的影响及其分子机理。第一部分HGF在食管癌中的表达及意义目的:本部分研究主要分析ESCC中的基因表达图谱以及影响其发生和发展的信号通路方法:首先利用RNA-seq方法分析ESCC患者食管癌组织及癌旁组织中的基因表达差异,筛选与ESCC相关基因并分析HGF在食管癌中表达情况,KEGG信号通路分析预测了所筛选基因在与癌症相关信号通路中的富集情况,并利用Real-Time PCR对测序结果进行进一步的验证。进一步利用TCGA数据库分析食管癌中HGF与cyclin E的表达是否存在协同性以及HGF表达高低与患者肿瘤分期和预后的关系。最后利用Real-Time PCR、Western blotting和免疫组化等分子生物学手段分析HGF在ESCC组织及癌旁组织的表达情况。结果:我们发现29个基因在食管癌组织中呈高表达,4个基因在食管癌组织中呈低表达,其中HGF和cyclin E在食管癌组织中均呈高表达。通过KEGG信号通路分析发现PI3K/AKT信号通路在食管癌组织中是激活最明显的信号通路。Real-Time PCR进一步验证了通过RNA-seq分析出的差异表达基因,HGF、cyclin E基因在食管癌组织中均表达上调（p<0.05）。通过TCGA数据库分析发现与对应的癌旁组织相比,食管癌组织中HGF和cyclin E呈高表达并且存在协同性（p<0.01）。TCGA数据库分析结果发现:HGF低表达的食管癌患者的无进展生存期和总体生存时间显着优于对照组,食管癌组织中的HGF表达水平越高,肿瘤的病理分期越晚（p<0.05）。Real-Time PCR、Western blotting和免疫组化等分子生物学分析结果发现,与对应的癌旁组织相比,ESCC组织中的HGF无论是mRNA水平还是蛋白水平呈高表达（p<0.05）。结论:HGF广泛存在食管癌肿瘤细胞中,并且可能通过参与PI3K/AKT信号通路影响食管癌的发生发展,并随着肿瘤的进展HGF的表达也逐渐增加,与患者的无病生存期及总生存时间呈负相关。第二部分 HGF对食管鳞癌细胞生物学功能的影响目的:本部分研究主要探究HGF对ESCC细胞生物学功能的影响,从而为临床将HGF作为ESCC治疗靶点提供新的理论基础。方法:本部分从ESCC细胞水平探究HGF对细胞存活、增殖、侵袭、凋亡以及肿瘤形成的影响。首先,选取2个ESCC细胞系,Real-Time PCR分析HGF基因表达情况,将细胞系分为HGF低表达和高表达,并利用Real-Time PCR、Western blotting和免疫荧光分别从mRNA水平和蛋白水平分析了两个细胞系中HGF的表达和定位。Western blotting 方法检测了 EC9706 和 KYSE-2 中 E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达情况。然后在HGF高表达的细胞系中利用shRNA敲低HGF的表达,在HGF低表达的细胞系中利用cDNA过表达HGF。利用CCK-8试验检测HGF表达变化对ESCC细胞活性的影响;利用克隆形成试验检测HGF表达变化对ESCC细胞增殖的影响;流式细胞仪检测两组细胞系细胞周期;Western blotting检测了 HGF表达变化对ESCC细胞周期相关蛋白表达的影响;Annexin V试验检测两组细胞系细胞凋亡;利用Western blotting检测了 HGF表达变化对ESCC细胞凋亡相关蛋白表达的影响;Real-Time PCR、Western blotting方法检测了过表达和敲低HGF后细胞系中E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达情况;Transwell试验检测过表达和敲低HGF后细胞系中ESCC细胞迁移和侵袭情况;小鼠皮下移植瘤模型探究过表达和敲低HGF后细胞系ESCC细胞肿瘤形成的情况;HE染色和Tunel试验观察小鼠肿瘤组织细胞的凋亡情况。分析HGF表达的改变对细胞存活、增殖、侵袭、凋亡以及肿瘤形成的影响。结果:Real-Time PCR和实验结果发现,HGF在KYSE-2细胞系中呈低表达,在EC9706细胞系中呈高表达（p<0.01）。Western blotting检测发现EC9706中HGF的蛋白表达水平显着高于KYSE-2（p<0.05）。鉴定HGF高表达与低表达细胞系后,我们利用免疫荧光对两个细胞系中HGF的表达定位进行了分析,结果发现在HGF高表达的EC9706中,HGF主要定位在核里;在HGF低表达的KYSE-2中,HGF主要定位在胞质中。Western blotting检测结果显示与HGF低表达的KYSE-2相比,HGF高表达的EC9706中E-cadherin表达较低,而N-cadherin和vimentin表达较高（p<0.05）,提示HGF高表达的ESCC细胞系更容易发生EMT。利用CCK-8试验检测HGF表达变化对ESCC细胞活性的影响,结果发现HGF的过表达能够显着提高细胞的活性（p<0.05）;与之相反,HGF的敲低能够显着抑制细胞的活性（p<0.05）。克隆形成试验检测结果发现,HGF的过表达能够显着促进细胞的增殖（p<0.01）;HGF的敲低能够显着抑制细胞的增殖（p<0.01）。流式细胞仪检测结果发现,HGF过表达后细胞处在S期的比例显着增多,G1期比例显着减少（p<0.01）;在EC9706中敲低HGF的表达,结果发现HGF的敲低细胞处在S期的比例显着减少,G1期比例显着增多（p<0.05）。Western blotting方法检测HGF表达变化对ESCC细胞周期相关蛋白表达的影响,结果发现HGF过表达能够显着促进KYSE-2中PCNA和Cyclin D1的表达（p<0.05）;HGF的敲低能够显着抑制EC9706中PCNA和Cyclin D1的表达（p<0.05）。利用Annexin V试验检测HGF表达变化对ESCC细胞凋亡的影响,结果发现HGF过表达后细胞凋亡的比例显着减少（p<0.05）;HGF的敲低细胞凋亡比例显着增多（p<0.05）。随后,我们利用Western blotting检测了 HGF表达变化对ESCC细胞凋亡相关蛋白表达的影响,结果发现HGF过表达能够显着抑制KYSE-2中Caspase-7和Caspase-9的表达（p<0.05）;HGF的敲低能够显着促进 EC9706 中 Caspase-7和Caspase-9 的表达（p<0.05）。利用 Real-Time PCR、Western blotting和免疫荧光等分子生物学手段检测HGF表达变化对ESCC细胞EMT相关蛋白表达的影响,结果发现与HGF的过表达后HGF主要聚集在KYSE-2细胞核内,并且能够抑制E-cadherin的表达,促进N-cadherin和vimentin的表达（p<0.05）;HGF的敲低后HGF主要分布在EC9706细胞胞质中,并且能够促进 E-cadherin 的表达,抑制 N-cadherin和vimentin 的表达（p<0.05）。Transwell试验检测两组细胞系中ESCC细胞侵袭情况结果发现,HGF的过表达能够显着促进细胞的侵袭（p<0.05）;HGF的敲低能够显着抑制细胞的侵袭（p<0.05）。我们通过小鼠皮下移植瘤模型探究HGF表达变化对ESCC细胞肿瘤形成的影响。结果发现HGF的过表达能够显着促进肿瘤的形成和生长（p<0.01）;HE染色和Tunel试验显示HGF的过表达能够显着促进肿瘤组织内细胞的增殖,抑制细胞的凋亡（p<0.01）。HGF的敲低能够显着抑制肿瘤的形成和生长（p<0.01）;HE染色和Tunel试验显示HGF的敲低能够显着抑制肿瘤组织内细胞的增殖,促进细胞的凋亡（p<0.01）。结论:本部分研究我们通过体外细胞实验和体内移植瘤模型证明HGF能够促进ESCC细胞的增殖、存活、侵袭,抑制细胞的凋亡,促进ESCC肿瘤的形成。第三部分HGF影响食管鳞癌细胞生物学性的分子机制目的:本部分研究主要探究HGF影响ESCC细胞生物学性的分子机制。方法:我们首先Western blotting和免疫组化方法检测了 ESCC组织、癌旁组织中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况;再用Western blotting方法检测了 ESCC细胞系中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。随后,我们在两个细胞系中改变HGF的表达,检测PI3K/AKT信号通路的激活情况;Western blotting方法检测了过表达或者敲低HGF的ESCC细胞系中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况;免疫组化方法检测小鼠皮下移植瘤中HGF及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达情况。我们在HGF低表达的细胞系中过表达HGF,再利用PI3K抑制剂处理细胞,在HGF高表达的细胞系中敲低HGF的表达,再利用PI3K激动剂处理细胞。利用克隆形成试验检测HGF表达变化对ESCC细胞增殖的影响;Transwell试验检测两组细胞系中ESCC细胞迁移和侵袭情况;小鼠皮下移植瘤模型探究上述细胞系ESCC细胞肿瘤形成的情况。以此观察细胞增殖、侵袭以及肿瘤形成的能力。结果:Western blotting和免疫组化实验结果显示与对应的癌旁组织相比,ESCC组织中HGF呈高表达,PI3K/AKT信号通路中的AKT、mTOR的磷酸化水平显着增高（p<0.05）,且PI3K/AKT信号通路中上游负调控蛋白PTEN的表达显着降低（p<0.05）。Western blotting实验结果显示与KYSE-2细胞系相比,EC9706细胞系中AKT、mTOR的磷酸化水平显着增高,PTEN的表达显着降低（p<0.05）;此外,我们还发现HGF高表达的EC9706细胞系中cycin E的表达也会异常增高（p<0.05）。Western blotting实验结果显示HGF的过表达会显着促进AKT和mTOR的磷酸化水平,显着抑制PTEN的表达,同时会促进cyclin E的表达（p<0.05）;敲低HGF的表达,我们发现AKT和mTOR的磷酸化水平显着降低,PTEN的表达水平显着增高,同时会抑制cyclin E的表达（p<0.05）。小鼠皮下移植瘤免疫组化实验结果显示HGF过表达能够促进肿瘤中AKT的磷酸化,抑制PTEN的表达（p<0.05）;HGF的敲低能够抑制肿瘤中AKT的磷酸化水平,促进PTEN的表达（p<0.05）。克隆形成实验结果发现PI3K抑制剂则会显着抑制细胞克隆的形成（p<0.01）;而PI3K激动剂剂则会显着促进细胞克隆的形成（p<0.01）。Transwell试验结果发现,HGF过表达能够显着促进细胞的侵袭,而HGF过表达+PI3K抑制剂则会显着抑制细胞的侵袭（p<0.05）;HGF敲低能够显着抑制细胞的侵袭,而HGF敲低+PI3K激动剂剂则会显着促进细胞的侵袭（p<0.05）。小鼠皮下移植瘤模型实验结果显示HGF过表达能够显着促进细胞肿瘤的形成,而HGF过表达+PI3K抑制剂则会显着抑制细胞肿瘤的形成（p<0.01）。HGF敲低能够显着抑制细胞肿瘤的形成,而HGF敲低+PI3K激动剂剂则会显着促进细胞肿瘤的形成（p<0.01）。结论:通过本部分研究,我们证明了 HGF主要作用于PI3K/AKT信号通路的上游,抑制PTEN的表达、促进AKT和mTOR的磷酸化,激活PI3K/AKT信号通路,进而促进ESCC细胞的增殖、侵袭和肿瘤的形成。因此,HGF及其调控的PI3K/AKT信号通路可以作为临床ESCC治疗的潜在靶点。
骆芳[10]（2021）在《CADM4在非小细胞肺癌生长和转移中的作用及机制研究》文中研究指明前言肺癌是世界范围内发病率及死亡率最高的恶性肿瘤,按照病理类型分为小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）和非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）,其中,NSCLC约占所有肺癌患者的85%。肺癌的早期症状并不典型,并且极易被忽视,近70%的肺癌患者在诊断时已经出现局部或远处转移,降低了治疗预期。目前,临床NSCLC的治疗,早期以根治性手术为主,辅以放化疗、靶向治疗,晚期则以全身治疗为主。这其中传统放、化疗的治疗效果有限,靶向治疗、抗血管生成治疗、免疫检查点抑制剂的临床应用使患者的预后有了较大的提升。据2021年最新统计,NSCLC患者2年相对生存率达到42%。这与NSCLC的临床治疗探索以及基础相关研究的努力密不可分。因此,深入探讨NSCLC发生、发展的分子机制对于新型抗肿瘤药物的研发和预后的改善至关重要。CADM4是一种免疫球蛋白样细胞粘附分子,研究表明CADM4在前列腺癌、胶质瘤、结直肠癌、肾透明细胞癌和乳腺癌等多种肿瘤组织或肿瘤细胞中存在下调表达。通过体内外过表达CADM4的方式,能在体外抑制结直肠癌细胞的增殖、促进其凋亡,并且能在体内抑制结直肠肿瘤的生长。肾透明细胞癌患者中低表达的CADM4与血管浸润、肿瘤大小以及转移密切相关,同时也在体内证明了CADM4的抗肿瘤生长的作用。而且,CADM4还被证明与结直肠腺癌患者的不良预后有相关性。然而,CADM4在NSCLC中的表达高低情况、及在其生长和转移中是否发挥影响作用、及相关的机制是如何的从未见报道。PI3K/Akt信号通路被多项研究证实参与肿瘤细胞的生长、转移和侵袭等重要生理过程。而且Akt在很多肿瘤中都被证明受到激活,其中也包括NSCLC。然而,CADM4在NSCLC中是否可以调控Akt信号通路并不确定。基于上述情况,本课题首先明确CADM4在NSCLC临床新鲜组织中是否异常表达。随后,在人NSCLC细胞系中改变CADM4水平,观察其对该细胞的生长及转移是否有影响。之后,进一步采用Akt信号通路激动剂SC79或抑制剂LY294002作用于细胞,明确由CADM4介导的NSCLC细胞生长及转移是否得到逆转,以明确NSCLC中CADM4调控细胞生长及转移的机制。最后,建立裸鼠移植瘤模型,在体内干预CADM4表达,观察肿瘤的生长及转移情况,进一步验证细胞实验的结论。本研究旨在为NSCLC确定一个具有潜在开发价值的靶点。研究方法本实验分为三部分:首先,通过western blot及real-time PCR检测方法,明确临床中收集的40例NSCLC患者的癌及癌旁组织中,CADM4在蛋白及m RNA水平上的表达。然后,对人NSCLC细胞A549及NCI-H1299进行瞬时转染,过表达或下调CADM4,使其在细胞中表达升高或降低。通过CCK-8实验方法检测细胞的增殖能力,通过流式细胞术检测各组细胞的周期是否有差异,通过western blot方法检测细胞周期相关蛋白CDK6、cyclin E1、cyclin D1以及p27的表达情况,采用划痕实验检测各组细胞的迁移距离,采用transwell实验方法检测各组细胞的侵袭差异,用明胶酶谱方法检测与侵袭相关的蛋白MMP-2和MMP-9的活性。western blot检测CADM4过表达、下调后对Akt磷酸化水平的影响,初步判断Akt信号通路是否与CADM4有关。在对人NSCLC细胞CADM4过表达、干扰的基础上,用Akt激动剂SC79或抑制剂LY294002作用于细胞,再通过上述多种检测方法明确激活或阻断Akt信号通路后,CADM4介导的对肿瘤细胞增殖、周期、迁移、侵袭的影响是否逆转。最后,通过皮下注射CADM4稳定过表达或下调的两株NSCLC细胞方法建立裸鼠移植瘤模型,测量并计算肿瘤的体积和重量,western blot方法检测肿瘤组织中CADM4蛋白的表达水平,免疫组化方法检测ki67表达,明确CADM4在体内对NSCLC生长的影响。通过尾静脉注射CADM4稳定过表达或敲除的细胞,建立裸鼠肿瘤转移模型,HE染色观察肺组织及肝组织中病理变化。研究结果一、NSCLC临床样本中CADM4的表达临床收集40对NSCLC患者手术切除的新鲜癌组织及对应的癌旁组织,检测每个组织中CADM4蛋白及m RNA水平的表达情况。结果显示:与癌旁组织相比,在NSCLC组织中CADM4在蛋白水平及m RNA水平的表达均显着降低。二、CADM4在体外调节NSCLC细胞的生长和转移对A549及NCI-H1299细胞进行瞬时转染,过表达或下调CADM4。实验分为Vector组、CADM4过表达组、si NC组、si CADM4组。检测各组细胞增殖能力、细胞周期变化、增殖和周期相关蛋白表达情况、迁移、侵袭能力。结果显示:与Vector组细胞相比,CADM4过表达细胞的增殖、迁移与侵袭能力均显着下降,而处在S期、G2的细胞占总细胞的比例显着降低,同时与细胞周期相关的CDK6、cyclin E1、cyclin D1蛋白的表达量均显着下调、P27的表达水平则显着提高,明胶酶谱结果显示代表侵袭能力的两种蛋白MMP-9和MMP-2的活性显着降低。与si NC组相比,si CADM4组各种结果表现出与上述变化完全相反的趋势。并且,A549及NCI-H1299细胞系中结论相同。三、Akt通路在CADM4调控NSCLC细胞生长及转移中发挥的作用A549及NCI-H1299细胞中,分别过表达、下调CADM4后,检测Akt信号通路的活化状态,即p-Akt/Akt的比值。实验分组为:Vector组、CADM4过表达组、si NC组、si CADM4组。再用Akt信号通路激动剂SC79及抑制剂分别作用于过表达及下调CADM4细胞。首先,实验分组为CADM4+DMSO及CADM4+SC79组,用相应的实验方法检测各组细胞的增殖能力变化、细胞周期变化、以及同增殖和周期相关蛋白表达情况变化、迁移、侵袭能力变化。随后,实验分组为si CADM4+DMSO及si CADM4+LY294002,同样进行上述检测。结果显示:在两株细胞中CADM4过表达都会抑制Akt信号通路的活化,而下调CADM4后会促进Akt信号通路的活化。与CADM4+DMSO组相比,CADM4+SC79组细胞的增殖、迁移与侵袭能力显着提高,处在S期、G2的细胞比例显着提高,与细胞周期相关的CDK6、cyclin E1、cyclin D1蛋白的表达量均显着升高,而P27蛋白的表达水平则显着下降,激动剂SC79阻断了由于CADM4过表达对细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。与si CADM4+DMSO组相比,si CADM4+LY294002组细胞的增殖、迁移与侵袭能力显着下降,处在S期、G2的细胞比例显着降低,与细胞周期相关的CDK6、cyclin E1、cyclin D1蛋白的表达量均显着降低、而P27蛋白的表达水平则显着升高。Akt信号通路抑制剂LY294002作用于CADM4下调的NSCLC细胞后,CADM4下调对细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用被显着减弱。四、CADM4在体内调控NSCLC肿瘤的生长和转移在细胞实验中,我们构建并筛选出稳定过表达及下调CADM4的A549和NCI-H1299细胞。通过皮下注射CADM4稳定过表达或敲除的细胞,建立裸鼠移植瘤模型。测量并计算肿瘤的体积和重量,检测肿瘤中CADM4水平及ki67表达水平。通过尾静脉注射CADM4稳定过表达或敲除的细胞,建立裸鼠肿瘤转移模型,观察肺组织及肝组织中病理变化。实验分为Vector组、CADM4过表达组、sh NC组、sh CADM4组。结果显示:与Vector组相比,CADM4组形成的肿瘤体积、质量显着减小,CADM4的表达水平依然显着提高,Ki67显着降低,肝组织及肺组织中转移的结节数量显着减少。与sh NC组相比,CADM4组形成的肿瘤体积、质量显着增大,CADM4的表达水平依然显着降低,Ki67显着升高,肝组织及肺组织中转移的结节数量显着增多。结论1、CADM4在人NSCLC临床新鲜组织中的表达显着降低。2、体外实验过表达CADM4时,NSCLC的两株细胞的增殖能力、迁移能力、侵袭能力均显着下降;而在细胞中下调CADM4时,细胞的增殖能力、迁移能力、侵袭能力则显着提高。3、在NSCLC细胞中CADM4的过表达被证明可以抑制Akt信号通路的活性。4、使用Akt信号通路激动剂SC79后,之前因过表达CADM4对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用被减弱。使用Akt信号通路抑制剂LY294002作用于CADM4下调的细胞,先前因下调CADM4对细胞增殖、迁移、侵袭的促进作用被减弱。5、在体外实验中CADM4被证实通过Akt信号通路对NSCLC细胞的增殖、迁移与侵袭进行调控。6、在体内实验中过表达CADM4,NSCLC的生长和转移能力显着下降;而下调CADM4后,细胞的生长和转移能力显着上升。
二、细胞周期蛋白cyclin D1、CDK4在食管癌中的表达及其意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、细胞周期蛋白cyclin D1、CDK4在食管癌中的表达及其意义（论文提纲范文）
（2）毛蕊异黄酮诱导肝癌细胞凋亡机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 肝癌的研究进展 |
| 1.2 肝癌的主要影响因素 |
| 1.2.1 HBV和HCV感染 |
| 1.2.2 饮酒因素 |
| 1.2.3 肥胖因素 |
| 1.2.4 黄曲霉毒素感染 |
| 1.2.5 水质污染 |
| 1.3 肝癌的治疗方法 |
| 1.3.1 手术治疗 |
| 1.3.2 化学治疗 |
| 1.3.3 放射治疗 |
| 1.3.4 靶向治疗和免疫治疗 |
| 1.4 细胞信号途径 |
| 1.4.1 细胞凋亡 |
| 1.4.2 细胞周期 |
| 1.4.3 细胞迁移 |
| 1.4.4 活性氧 |
| 1.4.5 MAPK信号途径 |
| 1.5 毛蕊异黄酮的研究进展 |
| 1.5.1 抗炎作用 |
| 1.5.2 抗骨质疏松作用 |
| 1.5.3 抗肿瘤作用 |
| 1.6 目的及意义 |
| 2 实验材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 细胞系 |
| 2.1.2 主要试剂及试剂盒 |
| 2.1.3 关键的实验设备 |
| 2.2 复苏细胞 |
| 2.3 细胞的培养及扩增 |
| 2.4 CCK-8法 |
| 2.5 Hoechst/PI法 |
| 2.6 流式细胞术 |
| 2.6.1 流式细胞术检测线粒体膜电位 |
| 2.6.2 流式细胞术检测细胞凋亡 |
| 2.6.3 流式细胞术检测细胞周期 |
| 2.6.4 流式细胞术检测细胞内活性氧的变化 |
| 2.7 蛋白质免疫印迹法 |
| 2.8 细胞划痕实验 |
| 2.9 统计学分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 CAL对肝癌细胞具有杀伤作用 |
| 3.2 CAL对肝癌细胞的诱导凋亡作用 |
| 3.3 CAL对肝癌HepG2细胞周期阻滞的作用 |
| 3.4 CAL对肝癌细胞的信号通路调控作用 |
| 3.5 CAL对细胞内活性氧及其介导的信号通路调控作用 |
| 3.6 CAL对肝癌细胞迁移的调控作用 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 6 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）五味子乙素对人宫颈癌Siha细胞增殖和迁移的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 研究背景与目的 |
| 1.2 文献综述 |
| 1.2.1 宫颈癌 |
| 1.2.2 丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK) |
| 1.2.3 信号转导与转录激活因子3(STAT3) |
| 1.2.4 细胞周期蛋白D1(Cyclin D1) |
| 1.2.5 B-细胞淋巴瘤2(BCL-2) |
| 1.2.6 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP) |
| 1.2.7 丙酮酸激酶M2(PKM2)与肿瘤 |
| 1.2.8 五味子乙素与肿瘤 |
| 第2章 实验研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 细胞和药品 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.1.5 主要溶液配制 |
| 2.2 基因及通路分析 |
| 2.3 细胞培养的实验方法 |
| 2.3.1 Siha细胞复苏 |
| 2.3.2 Siha细胞更换培养液 |
| 2.3.3 Siha细胞传代 |
| 2.3.4 Siha细胞冻存 |
| 2.3.5 细胞计数 |
| 2.4 主要检测方法 |
| 2.4.1 MTT法检测五味子乙素对Siha细胞增殖的影响 |
| 2.4.2 划痕实验法检测五味子乙素对Siha细胞迁移的影响 |
| 2.4.3 Western blot检测五味子乙素作用于Siha细胞后对蛋白PKM2、STAT3、CyclinD1、BCL-xl、MMP-2、MMP-9 的影响 |
| 2.4.4 Real-time PCR法检测五味子乙素作用于Siha细胞后对凋亡基因PKM2、STAT3、Cyclin D1、BCL-xl、MMP-2、MMP-9的影响 |
| 2.4.5 检测五味子乙素作用于Siha细胞后对葡萄糖摄取量的影响 |
| 2.4.6 检测五味子乙素作用于Siha细胞后对乳酸生成含量的影响 |
| 2.4.7 数据统计分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 基因及通路分析 |
| 3.2 MTT法检测五味子乙素对是Siha细胞增殖的影响 |
| 3.3 划痕法检测五味子乙素对Siha细胞迁移的影响 |
| 3.4 Westernblot检测五味子乙素作用于Siha细胞后对蛋白PKM2、STAT3、Cyclin D1、BCL-xl、MMP-2、MMP-9 的影响 |
| 3.5 Real-timePCR法检测五味子乙素作用于Siha细胞后对凋亡基因PKM2、STAT3、Cyclin D1、BCL-xl、MMP-2、MMP-9 的影响 |
| 3.6 检测五味子乙素作用于Siha细胞后对葡萄糖摄取量的影响 |
| 3.7 检测五味子乙素作用于Siha细胞后对乳酸生成含量的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（4）乙酰辅酶A羧化酶1通过调控CyclinD1/CDK4影响肾透明细胞癌细胞增殖（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 红油-O-染色 |
| 1.2 TCGA数据分析 |
| 1.3 RNA提取和实时荧光定量PCR |
| 1.4 Western 印迹检测 |
| 1.5 细胞培养 |
| 1.6 稳定敲减ACC1细胞株的构建 |
| 1.7 CCK-8检测细胞增殖 |
| 1.8 克隆形成能力检测 |
| 1.9 流式细胞周期检测 |
| 1.10 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 肾透明细胞癌细胞中脂肪含量增高 |
| 2.2 乙酰辅酶A羧化酶1在肾透明细胞癌组织中呈高表达，与病人组织学分期分级及不良预后有关 |
| 2.3 乙酰辅酶A羧化酶1稳定敲减细胞株的成功构建 |
| 2.4 乙酰辅酶A羧化酶1敲减降低肾透明细胞癌细胞中脂肪含量 |
| 2.5 乙酰辅酶A羧化酶1敲减抑制肾透明细胞癌细胞的增殖和克隆形成能力 |
| 2.6 乙酰辅酶A羧化酶1敲减诱导肾透明细胞癌细胞发生周期阻滞 |
| 2.7 乙酰辅酶A羧化酶1敲减抑制肾透明细胞癌细胞中细胞周期蛋白D1和CDK4的表达 |
| 3 讨论 |
（5）MiR-99a调控猪颗粒细胞增殖凋亡的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 、文献综述 |
| 1.1 miRNA的研究进展 |
| 1.1.1 miRNA的定义和研究方法 |
| 1.1.2 miRNA的生物合成和作用机制 |
| 1.1.3 miRNA的研究方向 |
| 1.2 miRNA对卵泡发育的影响 |
| 1.2.1 miRNA对哺乳动物生殖功能的调控 |
| 1.2.2 miRNA通过调节颗粒细胞的生长对卵泡发育的影响 |
| 1.2.3 不同闭锁程度卵泡中miRNAs在颗粒细胞中的差异表达及对颗粒细胞凋亡的调控 |
| 1.2.4 miR-99a的研究进展 |
| 1.3 本研究的目的与意义 |
| 第二章 、miR-99a调控猪颗粒细胞增殖凋亡的作用机制研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 组织、细胞和菌株 |
| 2.1.2 载体与质粒 |
| 2.1.3 工具酶及主要试剂 |
| 2.1.4 主要培养基及其制备 |
| 2.1.5 Western Blot实验所需材料 |
| 2.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其制备 |
| 2.1.7 主要实验仪器及设备 |
| 2.1.8 引物设计与合成 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 不同闭锁程度卵泡的分离 |
| 2.2.2 细胞的分离与培养 |
| 2.2.3 组织样品总RNA的提取 |
| 2.2.4 反转录及PCR |
| 2.2.5 PCR产物或酶切产物的电泳检测 |
| 2.2.6 PCR产物或酶切产物的回收与纯化 |
| 2.2.7 限制性内切酶酶切反应 |
| 2.2.8 外源DNA片段与质粒载体的连接反应 |
| 2.2.9 连接产物的转化 |
| 2.2.10 重组质粒的制备与鉴定 |
| 2.2.11 质粒与miRNA的转染(脂质体介导的瞬时转染法) |
| 2.2.12 双荧光素酶检测 |
| 2.2.13 细胞活力检测(CCK-8 法) |
| 2.2.14 细胞增殖/毒性检测(CCK-8 法) |
| 2.2.15 细胞周期检测(PI法) |
| 2.2.16 细胞凋亡检测(FITC/PI双染法) |
| 2.2.17 流式细胞术 |
| 2.2.18 生物信息学分析 |
| 2.2.19 统计学方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 miR-99a在不同闭锁程度的猪卵泡中的表达 |
| 2.3.2 miR-99a的生物信息学分析及靶基因预测 |
| 2.3.3 miR-99a靶向mTOR基因的双荧光素酶报告实验验证 |
| 2.3.4 离体猪颗粒细胞代数的选择与miRNA的转染条件 |
| 2.3.5 过表达miR-99a抑制猪颗粒细胞增殖 |
| 2.3.6 过表达/抑制miR-99a对猪颗粒细胞的细胞周期的影响 |
| 2.3.7 过表达/抑制miR-99a对猪颗粒细胞凋亡的影响 |
| 2.3.8 过表达/抑制miR-99a对猪颗粒细胞中基因表达的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 miR-99a在不同闭锁程度卵泡中的表达水平与作用途径 |
| 2.4.2 miR-99a靶基因的预测与分析 |
| 2.4.3 miR-99a靶向m TOR对颗粒细胞增殖的影响 |
| 2.4.4 miR-99a对颗粒细胞凋亡的影响 |
| 2.5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（6）新疆哈密哈萨克族食管癌病理特点及治疗预后的影响因素（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 1 资料及方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 治疗方式 |
| 1.3 临床资料收集 |
| 1.4 随访 |
| 1.5 统计学方法 |
| 1.6 技术路线 |
| 2 研究结果 |
| 2.1 新疆哈萨克族食管癌基线资料及病理特点 |
| 2.2 新疆哈萨克族食管癌的术前资料 |
| 2.3 新疆哈萨克族食管癌的手术治疗相关情况 |
| 2.4 总生存时间分析 |
| 2.5 影响新疆哈萨克族食管癌治疗预后的因素分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 新疆哈密哈萨克族食管癌的病理特点 |
| 3.2 食管癌的影像学特点分析 |
| 3.3 食管癌的生存情况分析 |
| 3.4 影响食管癌患者生存预后的因素分析 |
| 4 结论 |
| 5 本研究不足之处 |
| 参考文献 |
| 综述 新疆哈萨克族食管癌发病学的分子机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（7）FGFR-2基因多态性以及作为microRNA-494的靶基因与乳腺癌的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语/符号说明 |
| 第一章 前言 |
| 参考文献 |
| 第二章 中国人群中FGFR-2和PI3KCA基因变异与乳腺癌风险的关系 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 试剂耗材 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 研究人群 |
| 2.2.4 基因组DNA的提取和基因分型 |
| 2.2.5 统计分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 FGFR-2 rs1219648和PI3KCA rs6443624与BC风险的关系 |
| 2.3.2 FGFR-2 rs1219648或PI3KCA rs6443624与BC临床病理特征的关系 |
| 2.3.3 FGFR-2 rs1219648对BC患者预后的影响 |
| 2.4 实验讨论 |
| 2.5 实验结论 |
| 参考文献 |
| 第三章 miR-494过表达或沉默对乳腺癌细胞MDA-MB-453和MCF-7细胞行为的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 试剂耗材 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 病人组织样本 |
| 3.2.4 细胞培养 |
| 3.2.5 qRT-PCR |
| 3.2.6 细胞转染 |
| 3.2.7 细胞活力检测 |
| 3.2.8 细胞凋亡率的检测 |
| 3.2.9 Western blot检测 |
| 3.2.10 细胞迁移率检测 |
| 3.2.11 细胞侵袭率检测 |
| 3.2.12 统计方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 miR-494在BC细胞系及BC组织中的表达 |
| 3.3.2 在MDA-MB-453和MCF-7细胞中过表达和沉默miR-494 |
| 3.3.3 过表达或沉默miR-494对MDA-MB-453和MCF-7细胞增殖的影响 |
| 3.3.4 过表达或沉默miR-494对MDA-MB-453和MCF-7细胞凋亡的影响 |
| 3.3.5 过表达或沉默miR-494对MDA-MB-453和MCF-7细胞迁移的影响 |
| 3.3.6 过表达或沉默miR-494对MDA-MB-453和MCF-7细胞侵袭的影响 |
| 3.4 实验讨论 |
| 3.5 实验结论 |
| 参考文献 |
| 第四章 miR-494靶向FGFR-2基因抑制MDA-MB-453和MCF-7细胞行为 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试剂耗材 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 细胞培养 |
| 4.2.4 细胞转染 |
| 4.2.5 报告载体构建和荧光素酶报告基因测定 |
| 4.2.6 Western blot检测 |
| 4.2.7 细胞活力检测 |
| 4.2.8 细胞凋亡率检测 |
| 4.2.9 细胞迁移率检测 |
| 4.2.10 细胞侵袭率检测 |
| 4.2.11 统计方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 miR-494过表达对MDA-MB-453和MCF-7细胞中FGFR-2的表达的影响 |
| 4.3.2 FGFR-2是miR-494的一个靶基因 |
| 4.3.3 在MDA-MB-453和MCF-7细胞中过表达FGFR-2 |
| 4.3.4 miR-494通过调控FGFR-2影响MDA-MB-453和MCF-7细胞增殖 |
| 4.3.5 miR-494通过调控FGFR-2影响MDA-MB-453和MCF-7细胞凋亡 |
| 4.3.6 miR-494通过调控FGFR-2影响MDA-MB-453和MCF-7细胞迁移 |
| 4.3.7 miR-494通过调控FGFR-2影响MDA-MB-453和MCF-7细胞侵袭 |
| 4.3.8 miR-494通过调控FGFR-2影响MDA-MB-453和MCF-7细胞中的RAS/RAF/MEK/ERK信号通路 |
| 4.3.9 miR-494通过调控FGFR-2影响MDA-MB-453和MCF-7细胞中的PI3K/AKT信号通路 |
| 4.4 实验讨论 |
| 4.5 实验结论 |
| 参考文献 |
| 第五章 综述:乳腺癌疾病研究进展 |
| 5.1 乳腺癌概况 |
| 5.2 发病机制 |
| 5.2.1 遗传因素 |
| 5.2.2 基因突变 |
| 5.2.3 机体免疫功能下降 |
| 5.2.4 神经功能异常 |
| 5.3 预防与治疗 |
| 5.3.1 化疗 |
| 5.3.2 内分泌治疗 |
| 5.3.3 靶向治疗 |
| 5.3.4 免疫治疗 |
| 5.4 小结 |
| 附录附图 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间发表的论文 |
| 外文论文 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（8）PFTK1在直肠癌中的表达及临床相关性研究（论文提纲范文）
| 缩略词表(Abbreviation) |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 3.结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 6.参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 PFTK1 和 PCTK1 关于肿瘤的研究进展 |
| 参考文献 |
（9）HGF通过激活PI3K/AKT信号通路促进食管鳞癌发生和发展机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 HGF在食管癌中的表达及意义 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二部分 HGF对食管鳞癌细胞生物学功能的影响 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三部分 HGF影响食管鳞癌细胞生物学性的分子机制 |
| 引言 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述: 消化道恶性肿瘤治疗新靶点HGF/c-MET的研究进展 |
| 参考文献 |
| 英文缩写词表 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（10）CADM4在非小细胞肺癌生长和转移中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略 |
| 第一部分 CADM4在NSCLC患者癌组织中的表达 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 CADM4在NSCLC生长和转移中的作用及机制 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分 动物实验验证CADM4在NSCLC生长和转移中的作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 CADM4 及 Necl、Nectin家族其它成员在肿瘤中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
四、细胞周期蛋白cyclin D1、CDK4在食管癌中的表达及其意义（论文参考文献）
- [1]LncRNA CASC9对人肺腺癌A549细胞恶性生物学行为的影响[D]. 李芳. 南华大学, 2021
- [2]毛蕊异黄酮诱导肝癌细胞凋亡机制的研究[D]. 刘洋. 黑龙江八一农垦大学, 2021
- [3]五味子乙素对人宫颈癌Siha细胞增殖和迁移的影响及机制研究[D]. 吴赛男. 北华大学, 2021(12)
- [4]乙酰辅酶A羧化酶1通过调控CyclinD1/CDK4影响肾透明细胞癌细胞增殖[J]. 程婧,倪月莉,AGBANA Yannick Luther,云芳,杨晖,赵雷,李小渝,张雪丹,张巧,杨哲,况应敏,朱月春. 中国生物化学与分子生物学报, 2021(06)
- [5]MiR-99a调控猪颗粒细胞增殖凋亡的作用机制研究[D]. 侯晗琦. 广西大学, 2021(12)
- [6]新疆哈密哈萨克族食管癌病理特点及治疗预后的影响因素[D]. 王惠. 新乡医学院, 2021(01)
- [7]FGFR-2基因多态性以及作为microRNA-494的靶基因与乳腺癌的相关性研究[D]. 王阳. 山东大学, 2020(04)
- [8]PFTK1在直肠癌中的表达及临床相关性研究[D]. 张宇博. 安徽医科大学, 2020(02)
- [9]HGF通过激活PI3K/AKT信号通路促进食管鳞癌发生和发展机制的研究[D]. 谢波. 苏州大学, 2020(06)
- [10]CADM4在非小细胞肺癌生长和转移中的作用及机制研究[D]. 骆芳. 大连医科大学, 2021(01)