一、种猪场猪支原体肺炎(气喘病)控制与净化技术研究（论文文献综述）
倪黎纲,赵旭庭,王宵燕,徐盼,甘源,金文[1]（2021）在《感染肺炎支原体姜曲海猪肺组织差异表达circRNAs的筛选与分析》文中研究表明为探明姜曲海猪感染猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）后肺组织环状RNA（circular RNA,circRNA）差异性表达谱及其在抗Mhp感染中的作用,试验以姜曲海猪为研究对象,分为感染组和对照组,人工感染Mhp 28 d后,解剖采集肺组织,采用高通量测序和生物信息学软件分析circRNA的表达情况。测序数据比对参考猪基因组序列,共鉴定到23 632个circRNAs,差异表达circRNAs为213个,其中97个上调,116个下调。随机选择4个差异表达circRNAs进行实时荧光定量PCR验证,检测结果与测序结果基本一致。差异表达circRNA来源基因可注释到包括抗原加工递呈、溶酶体、白细胞跨内皮迁移等免疫应答信号通路。circRNA-miRNA-mRNA靶标关系分析显示,筛选到海绵结合miRNA数量最多的3个差异表达circRNAs,分别为:circRNA-17284（21个）、circRNA-04848（19个）和circRNA-17270（19个）;预测到6个与免疫调控相关的靶向miRNAs,分别为:ssc-miR-4331、ssc-miR-370、ssc-miR-328、ssc-miR-30c-3p、ssc-miR-122和ssc-miR-125b。本研究测定了感染Mhp的猪肺组织circRNA表达谱,筛选到与免疫调控相关的差异表达circRNA,这有助于阐明姜曲海猪对Mhp的易感机制,为抗病育种研究提供了参考依据。
徐忠[2]（2020）在《基于基因组信息对金华猪种质特性及其保护、利用的研究》文中研究表明金华猪是我国猪种资源宝库中的佼佼者,因其肉质优良、肉味鲜美,深受人们喜爱,特别是以其后腿作为原料加工制作的金华火腿,堪称世界一绝。在生产实践中,金华猪相比于西方引进猪种更容易感染猪气喘病,严重影响其生产效率。而目前对金华猪的这些特性的遗传基础及形成机制尚不清楚。在保种过程中,金华猪的保种效果不能有效评估,缺乏从分子水平上的评估方法。此外,在金华猪的杂交利用中,缺乏有效的杂种优势预测理论及配合力测定进行指导。为此,本研究的主要目的是利用全基因组信息对金华猪进行种质特性和保护、利用研究,开展以下工作:（1）首先对金华猪进行简化基因组测序,并与其它群体一起进行全基因组单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）检测;（2）对金华猪在遗传资源分类中的地位进行深入了解;（3）从基因组结构、功能特性和信号选择分析等对其分子种质特性进行挖掘;（4）对金华猪气喘病易感性的分子机制进行生物信息学挖掘和全基因组关联分析;（5）利用传统系谱和全基因组分子标记对其保种效果进行分析和评估;（6）最后利用杂种优势预测及配合力测定试验找出最优杂交利用的组合模式。具体研究内容和结果如下:（1）基因组测序与遗传变异检测:本研究首先对金华猪国家级保种场在群的202头金华猪采集了耳组织样,利用基于基因组简化与测序的基因型分型（genotyping by genome reducing and sequencing,GGRS）平台对其进行了建库实验和测序。结果共得到12.5亿条高质量Reads数,每个个体平均测序深度为6.13,平均覆盖度为3.3%。进一步结合实验室前期数据,对金华猪与江、浙、沪等中国地方品种和西方品种共19个品种914头猪进行了遗传变异检测。最终共得到114687个高质量的SNPs位点,这些位点在染色体上分布较均匀,说明测序结果较理想。特别是与现有猪的SNP数据库进行对比分析,其中有16 656个为本次新发现的SNPs多态标记,大大丰富了我国地方猪品种及西方引进品种的分子遗传标记数据库。（2）金华猪在遗传资源分类中的地位:本研究在分子层面对金华猪与其它群体间遗传距离、遗传分化和遗传结构进行了分析。从聚类分析和PCA分析可以看出金华猪所有个体聚在一起,而与其它群体较独立,有着独特的遗传结构;从ADMIXTURE的群体结构来看,金华猪群体最早独立出来,说明金华猪起源相对较早,具有着较为古老的祖先血统;从遗传距离、遗传分化和PCA结果上也可以看,相比于西方商业品种猪,金华猪与中国地方品种猪有着更近的遗传背景;由Treemix分析也可以看金华猪有向兰溪花猪迁移事件,可能是因为两者地理距离较近,有基因交流的可能性也更大。这些结果表明金华猪在遗传资源分类中具有独特的地位,为其作为独立品种提供了分子依据。（3）金华猪基因组结构和功能特性:基因组结构的不同是动物表型差异的遗传基础。我们对SNPs在基因组的分布、单倍型块和连续纯合性片段（runs of homozygosity,ROH）等基因组结构进行分析。在本研究总共检测到114 687个SNPs遗传变异中85 287（74.4%）在金华猪中存在多态,说明金华猪的遗传多样性相对较高。特别是有29 400（25.6%）个位点在其它群体表现多态但在金华猪群体中表现纯合,这些点所在基因主要参与色素沉积（GO:0043473～pigmentation）、对刺激反应的调节（GO:0048585～negative regulation of response to stimulus）和气喘病（hsa05310～Asthma）等,这些说明金华猪群体内一些与色素沉积、对刺激的反应和气喘病相关的基因位点已经发生纯合。我们发现了249个金华猪品种特异的SNPs,这些SNPs可以作为品种鉴定的候选位点。金华猪单倍型块在基因组分布并不均匀,在6号染色体的单倍型区块最多（862个）,覆盖区域最长（33101 Kb）,占相应染色体总长度的比例最大（19.38%）。金华猪中最长的单倍型块位于7号染色体57 101 799～57 601 268的位置上,位于其中的基因与免疫、肌内脂肪含量和繁殖相关。金华猪基因组中ROH分布也不均匀,短的ROH片段多位于染色体的两端。在所有金华猪中出现频率最高的位点是Chr3:37449853,距离此位点最近的基因是SEC14L5,此基因与脂质转运与代谢相关。这些结果为进一步深入揭示金华猪种质特性的遗传机制提供参考。（4）金华猪选择信号分析:金华猪之所以形成如此独特的表型特征,是长期的自然选择和人工选择造成的,而这些选择信号可能是造成金华猪种质特性的原因。本研究通过基于金华猪群体内的（REHH、i HS和CLR三种方法）和金华猪与其它群体间的（基于PLS和XPEHH）信号选择方法,对金华猪基因组上的受选择区域进行了分析。金华猪群体内选择信号分析共找到62个候选基因,与肉质、繁殖、生长和免疫等相关（如PIK3R6、NOS2、ZNF423、IL21R）。而这些性状相关的候选基因为后续的功能基因验证提供了一定的指导意义。在金华猪与其它猪群体间的信号选择方法中,我们还找到了:与毛色性状相关的基因如MYO7A、EDNRB和KIT等;与骨组织生长相关的基因如PBX1、GSG1L和PAPPA2等;与肺部疾病相关的通路如气喘病通路（hsa05310～Asthma）和肺结核（hsa05152～Tuberculosis）等。这些可能与金华猪独特的两头乌毛色、皮薄骨细和易感气喘病等性状有关,值得深入研究。这些结果使我们对中国地方猪的基因组进化和选择机制有了更深入的了解。（5）金华猪气喘病相关研究:我们同时利用基因组到表型（选择信号分析方法）和表型到基因组（全基因组关联分析）研究分析金华猪气喘病的遗传机制,并进一步基于表达谱实验数据进行核实验证。选择信号分析方法是通过比较三个对气喘病易感的猪种（金华猪53头、二花脸猪31头、梅山猪80头）和两个相对不易感气喘病猪种（杜洛克猪48头、长白猪37头）的基因组,挖掘猪支原体肺炎（mycoplasmal pneumonia of swine,MPS）候选基因,结果找到了CYP1A1、TLR2和CXCL2等14个相关候选基因;同时对171头金华猪的基因型数据和连续100天的气喘病表型记录,利用全基因组关联分析（genome-wide association study,GWAS）找到KIAA1644、MAGI3、PGM1和ALK四个候选基因。这两种方法找到的18个候选基因中有2个（CYP1A1和TLR2）是前人研究已证实的,16个是本次研究新发现的。其中有4个基因（EPAS1,CXCL2,TLR2和IL7R）我们通过猪气喘病转录组的数据分析进一步进行了核实验证。这些MPS易感性位点可能是在对繁殖力和肉质等优良经济性状的选择过程中,由于多效性和搭便车效应从而导致受选择,在随后的选种中需要更加注意。本研究初步揭示了金华猪易感MPS的遗传机制,为后续金华猪抗MPS的基因组保护和和基因组选择方案提供指导作用。同时这些研究可能对人类呼吸系统疾病的研究起一定的参考作用。（6）金华猪保种效果分析:利用12 560个个体的系谱信息和6 018条繁殖记录对金华猪的保种效果进行纵向比较,发现在2009～2017年间,金华猪的近交系数稳定在较低（0.009左右）的水平,繁殖性能（总产仔数、活产仔数和出生窝重）的个体估计育种值（estimated breeding value,EBV）均呈现增加趋势,分别提升2.0头、1.9头和0.85kg,说明了近几年的总体保种效果较好。但利用传统系谱信息和分子遗传标记信息深入分析显示仍存在一些问题,需要进一步优化保种策略。其一,对本研究采样时的在群金华猪群体的近交系数、亲缘系数和血统结构进行了分析。分析结果表明金华猪个体平均近交系数和个体间亲缘系数总体虽较低,但也有极个别间较大,达到0.5以上,且金华猪每个血统个体数并不是很均匀,在以后的保种过程中群体结构有待优化。其二,系谱和分子计算的金华猪群体有效含量分别为63和88头,根据畜禽遗传资源受威胁程度的分类可知,金华猪可能仍处于受威胁状态,表明仍需进一步适当扩大保种群体规模,特别是基于分子标记指导选种、选配,逐步提高群体有效含量。其三,我们利用其它地方品种及西方品种等19个群体的分子遗传多样性指标,对金华猪的保种效果进行了横向比较,发现金华猪遗传多样性较高,但近交程度（基于分子的）在这些群体中处于中等水平,提示我们在今后保种过程中尽量避免近交,优化配种策略。本研究为金华猪今后的保种工作提供了参考价值。（7）金华猪的杂交利用:本研究基于全基因组遗传标记筛选金华猪候选杂交组合,并结合繁殖、育肥和屠宰等配合力测定试验确定了最优的杂交组合模式。首先利用全基因组性状特异（繁殖、健康、生长和胴体与肉质）的SNP对金华猪与三个西方引进品种杜洛克（DD）、大白猪（YY）和长白猪（LL）共180头猪的各种杂交组合进行了杂种优势的预测,结果显示在二元、三元和双杂交组合中最优选择为D×J、J×LY和DJ×LY。随后我们挑选了合适组合进行配合力测定试验,其中繁殖性能测定共88窝,育肥测定试验共91头,屠宰测定试验共83头。最终确定了DJ×LY为最佳的杂交组合模式。研究为金华猪的杂交利用提供了一套切实可行的方案。综上,本论文对金华猪种质特性的遗传基础及其形成机制进行了探究,进而为该遗传资源的保护、选育、利用奠定基础。这在非洲猪瘟流行的背景下,对我国地方猪遗传资源的保护和利用具有特殊意义。有关结果也为研究人类复杂性状的遗传机制提供了依据,对人类哮喘病等呼吸系统疾病的研究具有参考作用。
张焱焱[3]（2019）在《猪肺炎支原体ES-2株的特性研究及猪链球2型菌荚膜多糖合成相关基因的研究》文中认为猪呼吸道疾病是制约世界各地集约化养猪业快速发展的重要疾病之一。其中猪肺炎支原体是引起各国养殖业中猪的地方流行性呼吸道疾病气喘病的主要病原,气喘病作为一种发病率高和致死率低的慢性呼吸道疾病,主要引起猪慢性干咳、生长缓慢和对饲料利用率降低。自上个世纪三十年代该病首次被德国科学家报道以来,猪气喘病已经给世界各地养猪业造成严重的经济损失。在实际生产中,感染猪肺炎支原体的猪更容易继发感染细菌性病原,从而给养猪业造成更大的经济损失。猪链球菌2型是一种危害极大的人兽共患病病原体,能够感染人和猪,引起肺炎和脑膜炎。在当前养猪业中,猪链球菌2型经常继发感染患有支原体肺炎的保育猪肺组织,在猪链球菌2型与猪肺炎支原体的混合感染下,使保育猪的呼吸道疾病变得复杂多变,荚膜多糖在猪链球菌2型的致病过程中扮演重要角色,其中荚膜多糖的合成需要多个基因共同参与。本研究针对猪的复杂呼吸道疾病等科学问题,开展了对猪肺炎支原体的分离和培养工作;通过第三代测序技术完成了对新分离株的全基因组测序和组装,通过比较基因组学挖掘了其特有致病相关因子及致病性猪肺炎支原体的共有基因;通过动物实验评估了新分离野生株作为疫苗对猪的免疫保护效果。针对被预测参与荚膜多糖重复糖单元合成的4个基因（cps2E、cps2G、cps2J和cps2L）,通过基因缺失及生物学特性研究,确定了其在猪链球菌2型荚膜多糖合成中的作用。主要研究结果如下:1.猪肺炎支原体ES-2株的分离培养及致病性研究本研究采用了一种多点取样连续传代的方法,并通过使用Friis培养基成功从湖北恩施黑猪肺组织中分离出猪肺炎支原体,并将其命名为猪肺炎支原体ES-2株。ES-2株在改良Friis培养基中培养至48h左右,其生长滴度最高可达到1×1010CCU/mL,在固体平板上呈“煎蛋样”形态。ES-2细胞呈圆形或卵圆形,其直径在0.2-1.6μm之间,对卡那霉素（MIC=2μg/mL）最敏感。动物实验结果显示,猪肺炎支原体ES-2株对宿主具有高致病性,引起猪肺部出现典型的支原体肺炎“肉变”,支气管上皮细胞的纤毛分叉、变短甚至脱落等病变。在通过气管感染不同剂量猪肺炎支原体ES-2株（7×106 CCU、7×107 CCU、7×108 CCU和7×109 CCU）的感染组中,其中攻毒剂量为7×107 CCU的感染组发病率最高且病变最严重。2.猪肺炎支原体ES-2株的全基因组特征及比较基因组学分析本研究通过第三代测序PacBio方法完成对ES-2株全基因组的测序与组装,通过起始位点校正绘制了ES-2株基因组完成图,利用生物信息学工具预测基因组的ORFs,并进一步利用蛋白质数据库NCBI NR和UNIPORT对ORFs进行注释,利用COG数据库对注释的蛋白进行分类,通过与VFDB数据库比对挖掘其毒力因子。通过将ES-2株全基因组与从NCBI收集的161株分离自不同宿主的支原体全基因组做进化树分析,亲缘关系显示ES-2株与已报道的另外8株猪肺炎支原体、1株猪絮状支原体和2株牛差异霉形体位于同一个分支,同猪鼻支原体的亲缘关系较近,与人肺炎支原体的亲缘关系最远。为了挖掘出致病性猪肺炎支原体的共有基因,本研究利用BlASTP比较了致病性（ES-2、168、7422和7448）和非致病性（J）猪肺炎支原体的全基因组,通过设置不同的相似度（0.75、0.80、0.85、0.90、0.95和0.99）,初步筛选出34个致病性猪肺炎支原体的共有基因。通过进一步比对分析,最终在氨基酸和核苷酸水平上,只鉴别出一个致病性猪肺炎支原体的共有基因（ES-200484）。3.猪肺炎支原体ES-2株对猪的免疫保护效果研究本研究基于猪肺炎支原体ES-2株具有生长滴度高且生长速度快的优点,将其制备成猪肺炎支原体ES-2株灭活疫苗,通过给仔猪免疫接种不同剂量的猪肺炎支原体ES-2株灭活疫苗来评估该灭活疫苗的最佳免疫保护剂量。免疫保护结果显示1.6×109 CCU/头份的ES-2株免疫剂量对猪的免疫保护效果最佳,1.6×107CCU/头份和1.6×108 CCU/头份的ES-2株免疫剂量能达到与商业猪肺炎支原体灭活疫苗（1.6×108 CCU/头份）对猪同等的免疫保护效果。4.猪链球2型菌荚膜多糖合成相关基因的研究本研究通过同源重组方法成功将4个基因（cps2E、cps2G、cps2J和cps2L）分别从猪链球菌2型中缺失,构建了4个荚膜多糖单基因缺失株（Δcps2E、Δcps2G、Δcps2J和Δcps2L）。实验结果显示,由于基因cps2E、cps2G、cps2J或cps2L的缺失,导致猪链球菌2型表面的荚膜多糖严重缺失,而且荚膜多糖中的唾液酸含量显着下降。体外和体内实验结果显示,荚膜多糖缺失突变株Δcps2E、Δcps2G、Δcps2J或Δcps2L与宿主的相互作用发生明显变化,对小鼠动物模型的致病能力显着下降。总之,本研究证实了基因cps2E、cps2G、cps2J和cps2L参与了猪链球菌2型细胞表面荚膜多糖的合成,并且进一步的研究表明这些基因在猪链球菌2型对宿主的入侵及定殖过程中发挥重要作用。
李宗昌[4]（2016）在《宁波地区猪支原体肺炎（MPS）流行病学调查及临床免疫效力实验》文中指出猪支原体肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS）是由猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）感染引起的一种慢性呼吸道传染病,以咳嗽、喘气和生长发育迟缓为主要临床特征。该病极难防控,给养猪业带来巨大的损失。如何经济有效的控制猪支原体肺炎一直是困扰全球养猪业的难题,目前研究表明控制该病临床发病率的最好方法是利用疫苗免疫进行防控。本研究为了调查猪支原体肺炎区域性的流行规律,通过对宁波市地区内多个规模化养殖场采用了实地调查、临床样品采集、实验室检测及实验数据分析等方法确诊该区域养殖场的猪肺炎支原体感染十分严重,并成功建立了以疫苗免疫来控制猪肺炎支原体的防制方法,主要研究内容如下:1、猪支原体肺炎流行病学调查:通过对猪群的临床观察、屠宰猪肺样品具有猪支原体肺炎典型病变数占比达52.5%;随机采集的临床样品PCR方法检测猪肺炎支原体病原阳性率达到26.7%;同时对非接种猪肺炎支原体疫苗猪群采用ELISA试剂盒进行血清抗体监测,结果阳性率达到42.7%。根据上述检测结果分析出宁波地区养殖场的猪肺炎支原体感染十分严重。2、猪支原体肺炎血清学调查:通过对随机抽采的母猪血清样本进行监测,结果血清抗体阳性率达到100%,说明母猪群的抗体水平很高;2周龄仔猪MH母源抗体阳性率达到68.7%,6周龄达到最低水平为16.0%,说明母源抗体是随着猪龄不断增长而逐渐降低;之后又开始出现上升,到13周龄达到最高为71.0%。表明猪支原体肺炎感染与猪的日龄有明显的相关性,为猪群免疫日龄的选择提供科学数据支撑。3、疫苗免疫效力检验方法:通过宁波地区调查猪场标定的阴性猪群为试验对象,选用商品化的猪肺炎支原体2种灭活疫苗和1种活疫苗及不免疫猪群进行分组（I、II、III、IV组）免疫,每组20头,并在免疫后14d、28d、42d、56d采集血清样本进行抗体水平检测分析和比较、临床症状观察统计咳嗽情况及剖检观察肺部病变,结果发现:（1）14日龄时各组猪群的猪肺炎支原体血清抗体阳性率均为0且差异不显着;28日龄至56日龄时灭活苗I、II两组的阳性率持续上升;活疫苗III组的血清抗体阳性率一直为0,不免疫组IV组猪群的血清抗体阳性率为10%,疑似为野毒感染导致;说明灭活疫苗比活疫苗生成较高的血清抗体。（2）通过临床观察统计猪支原体肺炎咳嗽发病率,14日龄时各组猪群的猪支原体肺炎临床发病率率均为0;灭活疫苗Ⅰ、Ⅱ两组发病率低于对照Ⅳ组但高于活疫苗Ⅲ组,说明活疫苗在控制猪支原体肺炎临床症状方面优于灭活苗组;（3）剖检肺部病变观察分析:每组随机挑选1头猪观察肺部病变情况,结果对照组Ⅳ组肺部出现明显猪支原体肺炎病变,灭活疫苗Ⅰ、Ⅱ两组均有少量病变但差异不显着,活疫苗Ⅲ组没有明显病变,说明活疫苗对保护肺部好于灭活苗,同时证明了选择合适的疫苗免疫是有效控制猪支原体肺炎的最佳手段。
甘源[5]（2015）在《猪气喘病的诊断及其阴性猪群的建立》文中研究说明猪气喘病是由猪肺炎支原体（Mycoplasmahyopneumoniae,Mhp）感染引起的一种慢性呼吸道传染病,以咳嗽、喘气和生长发育迟缓为主要临床特征。该病极难防控,给养猪业带来巨大的损失。如何经济有效的控制猪气喘病一直是困扰全球养猪业的难题,目前研究表明控制该病的最好方法是从源头抓起彻底净化气喘病病原。本研究在结合我们研究室对猪肺炎支原体防控及致病机理研究成果的基础上,借鉴前人的研究经验,通过气喘病阳性猪群的诊断,以气喘病阳性母猪为基础,采用集成联合用药、隔离早期断奶（SEW）和"三点式"生产体系的培育方法,成功建立了 190头气喘病阴性群猪。主要研究内容如下:1、猪气喘病阳性猪群的诊断:选择疑似感染猪肺炎支原体且正在发病的某养殖场,通过流行病学调查、临床症状观察、咳嗽指数统计分析、剖解评分、病原分离培养鉴定、血清抗体监测及鼻拭子中抗原荧光定量PCR方法检测等实验室诊断结果综合分析,确诊该场感染了猪肺炎支原体并发病,为后期气喘病的净化方法及监控诊断得以科学、有效的实施奠定基础。2、气喘病阴性群猪的建立:本研究以上述猪群为基础,先通过妊娠母猪的筛选,母猪程序性用药,再通过SEW技术、屏障隔离系统、独立饲养管理体系及仔猪程序性用药的培育方法,培育获得5批共190头猪,通过猪肺炎支原体血清抗体检测和荧光定量PCR检测鼻拭子中抗原检测,持续4个月的检测,证明新培育的5批猪在35日龄后血清抗体均为阴性,鼻拭子中抗原检测全为阴性,表明集成联合运药、SEW和"三点式"生产管理体系技术可以有效净化猪肺炎支原体,为国内猪气喘病的控制和净化提供理论基础及临床实践经验。
陈财[6]（2015）在《猪支原体肺炎活疫苗（168株）免疫为核心的猪气喘病净化技术研究》文中认为猪气喘病是由猪肺炎支原体引起的呼吸道疾病,是全球养猪业最流行的疾病之一。它可以感染猪场或猪生产系统中所有日龄以及所有类型的猪只,并可以和其它病原混合感染引起猪呼吸道疾病综合征,对全世界的养猪业造成巨大的损失。防控该病最主要的手段之一是疫苗免疫。目前市场上有灭活苗和活疫苗两种猪支原体肺炎相关疫苗,其中猪支原体肺炎活疫苗通过肺内注射免疫不仅不受母源抗体的影响,且能阻止野毒的入侵,具有灭活苗无法比拟的优势。为进一步探讨猪支原体肺炎活疫苗的免疫保护力,本研究选取了猪支原体肺炎活疫苗（168株）为研究对象,分别从免疫效力比较,临床免疫效果评价两方面探讨其免疫保护效果,在此基础上,制定了以疫苗免疫为核心的猪肺炎支原体净化程序,并成功净化了一个猪场的猪气喘病。主要内容如下：研究内容一：猪支原体肺炎疫苗免疫效力比较。本研究通过对猪支原体肺炎肺内注射活疫苗、猪支原体肺炎滴鼻免疫弱毒苗和猪支原体肺炎肌肉注射灭活苗进行免疫效力实验,研究发现,猪支原体肺炎活疫苗（168株）肺内注射弱毒苗组,在免疫后7天能够产生较高的sIgA水平,免疫后42天仍能保持较高抗体水平：攻毒保护力达到100%；同时,从日增重上来看,该组3头猪在攻毒后28天,增重分别为2.4、2.7、3.8公斤,在实验组中增重最高。结论：肺内注射猪支原体肺炎活疫苗（168株）对猪的保护性最佳,可以用于规模猪场的净化研究。研究内容二：猪支原体肺炎活疫苗（168株）的临床应用效果评价。选择不同规模,未免疫猪肺炎支原体的三个猪场实施仔猪5-7日龄肺内注射免疫,通过育肥猪全程死亡率,13及18周育肥猪气喘病发病率,平均咳嗽指数以及出栏猪肺脏肉变等指标,探讨该苗的临床效果。结果：三个猪场育肥猪全程死亡率相比上一年分别下降了1.8%,7.3%以及14.2%；疫苗免疫半年和一年后13周龄及18周龄的育肥猪气喘病发病率均极显着的下降；三个场无论是兴奋时还是安静时,13周龄和18周龄的育肥猪平均咳嗽指数均显着下降。；出栏猪肺脏肉变的比例均在10%以内。结论：猪支原体肺炎活疫苗（168株）临床应用具有较好的免疫保护力。研究内容三：猪肺炎支原体净化技术应用及效果评价。采用以新生仔猪猪支原体肺炎活疫苗（168株）肺内注射疫苗为核心,辅以包括母猪封群,药物控制,瑞士减群法等的猪肺炎支原体净化程序,对一新建猪场,新进430头后备母猪进行临床应用分析。通过临床观察,每三月一次的平均咳嗽指数,血清学,SIgA,病原学监测累计9个月,以验证净化效果。结果：净化程序实施9个月内,无猪支原体肺炎临床症状,母猪和育肥猪咳嗽指数均为0：血清学监测显示母猪猪肺炎支原体抗体阳性率逐渐减低,至9月后全为阴性,21日龄及60日龄育肥猪与母猪趋势相同,120日龄育肥猪抗体始终保持阴性；SIgA结果：21日龄时OD值为在0.4-0.5之间,60日龄时相比21日龄,净化3月后没有显着差异,但净化6月和9月时相比对应的21日龄显着上升。120日龄时在净化3月内显着高于21日龄及60日龄,净化6月及9月后显着高于21日龄（P<0.01）,虽略高于60日龄,但差异不明显；病原监测发现母猪鼻拭子猪肺炎支原体阳性率逐渐降低,至9月后为0,育肥猪始终保持10%-40%的阳性率,P380引物鉴别诊断发现所检出的支原体为免疫的活疫苗,并不是支原体野毒。结论：利用以猪支原体肺炎活疫苗（168株）肺内注射免疫为核心的猪肺炎支原体净化程序,成功净化了一个猪场的猪气喘病。总结：本研究主要探索适合国内猪场的猪气喘病净化技术,为以后临床上猪气喘病的控制和净化提供理论依据和实践经验。本研究通过三个实验展开,并得出结论：1.通过比较不同猪支原体肺炎疫苗的免疫效力证实猪支原体肺炎活疫苗（168株）具有较好的免疫保护效果。2.通过猪支原体肺炎活疫苗（168株）田间试验发现该苗在临床实际应用中能显着降低猪气喘病发病率。3.通过以本研究建立的猪支原体肺炎活疫苗（168株）免疫为核心的猪肺炎支原体净化程序,成功净化了一个猪场的猪气喘病。
陈财,华利忠,甘源,徐飞扬,袁厅,吴猛,吴其亮,高昆,邵国青[7]（2014）在《猪支原体肺炎净化研究进展》文中研究指明猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害养猪业生产的传染病,该病传播迅速,且一旦侵入就难以清除,控制和净化该病已成为世界养猪生产所面临的挑战。世界各国都采取了各种不同的措施净化此病,也取得了一定的成效。本文列举了美国,欧洲各国及中国猪支原体肺炎净化成功例子及经验,并加以总结归纳,为国内猪支原体肺炎的净化提供参考。
谢林,邵国青,何玉友,曲向阳,徐苏标,朱连德,王爱国[8]（2014）在《重视猪支原体肺炎的免疫》文中提出猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体引起的一种慢性呼吸道传染病,俗称"猪气喘病"。作为一种慢性消耗型疾病,猪支原体肺炎因致死性不高,一直未受到养猪人的普遍重视。然而,该病正日渐成为猪场的隐形杀手:对猪只的免疫机制造成破坏,继发感染其他呼吸道疾病,造成猪只日增重减少、饲料转化率降低,从而造成生产成本大幅增加,猪场经济效益低下。很多猪场在选择药物还是疫苗防控支原体肺炎面前往往陷入两难,而一些用过支原体疫苗的猪场则反映"猪好养了"。疫
华利忠,冯志新,武昱孜,刘茂军,邵国青[9]（2012）在《猪肺炎支原体净化检测程序研究进展》文中研究指明猪支原体肺炎（猪气喘病）是由猪肺炎支原体引起的一种严重危害全球养猪业生产的传染病之一。很多国家,特别是西欧各国和北美,均通过彻底净化病原的方式来控制该病的爆发。实行净化程序必须对净化后的猪群进行各项检测以确定净化成功与否。然而,每个猪场采用的检测方案都不一样,也没有形成一个统一的阴性群标准。本研究就国外猪肺炎支原体净化后阴性群的检测方法和不同检测方案做一综述,给国内猪场实施气喘病净化后检测方案的制定提供依据。
华利忠,邵国青,周勇岐[10]（2012）在《以疫苗免疫为核心的猪气喘病控制与净化技术》文中研究指明猪气喘病的控制和净化已成为养猪产业急需解决的难题,本文简述了国外的研究动态,提出控制和净化技术须从种猪、环境、疫苗和药物四个层次依次着手,介绍了常用的药物组合和用药策略,肯定了灭活疫苗的明显效果,报告了活疫苗（168株）在突破母源抗体,占位效应和刺激粘膜免疫和细胞免疫的显着作用,提出我国从龙头企业核心种猪场实施净化猪气喘病的可行思路,并提出具体的建议措施。
二、种猪场猪支原体肺炎(气喘病)控制与净化技术研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、种猪场猪支原体肺炎(气喘病)控制与净化技术研究（论文提纲范文）
（1）感染肺炎支原体姜曲海猪肺组织差异表达circRNAs的筛选与分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样本采集 |
| 1.2 RNA提取和质控 |
| 1.3 文库构建和质量控制 |
| 1.4 circRNA测序数据处理和分析 |
| 1.5 circRNA的表达差异和来源基因分析 |
| 1.6 差异表达circRNA的靶向miRNA预测和调控网络构建 |
| 1.7 差异表达circRNA的实时荧光定量PCR验证 |
| 2 结 果 |
| 2.1 circRNA测序与鉴定 |
| 2.2 差异表达circRNA的筛选与验证 |
| 2.3 差异表达circRNA来源基因的GO功能注释和KEGG富集分析 |
| 2.4 circRNA-miRNA-mRNA 靶标关系预测与分析 |
| 3 讨 论 |
| 4 结 论 |
（2）基于基因组信息对金华猪种质特性及其保护、利用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 文章部分缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 金华猪概况 |
| 1.1.1 产地分布及品种形成 |
| 1.1.2 种质特性 |
| 1.1.3 保种现状 |
| 1.1.4 研究进展 |
| 1.1.5 主要问题 |
| 1.2 猪的基因组研究 |
| 1.2.1 猪基因组的组装 |
| 1.2.2 基因组测序在猪中的应用 |
| 1.3 分子种质特性研究方法 |
| 1.3.1 遗传变异检测 |
| 1.3.2 基因组结构分析 |
| 1.3.3 基因组功能注释 |
| 1.3.4 选择信号分析 |
| 1.4 家畜遗传资源的保护 |
| 1.4.1 家畜遗传多样性 |
| 1.4.2 遗传多样性检测方法 |
| 1.4.3 在分子水平上评估遗传多样性的指标 |
| 1.4.4 保种相关理论和方法 |
| 1.4.5 保种方式 |
| 1.5 遗传资源的利用 |
| 1.5.1 利用的必要性 |
| 1.5.2 利用的主要途径 |
| 1.6 研究目的与意义 |
| 2 金华猪在遗传资源分类中的地位 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验动物与样品 |
| 2.1.2 主要试剂及其来源 |
| 2.1.3 主要仪器及设备 |
| 2.1.4 基因组DNA的提取及质量检测 |
| 2.1.5 文库的构建及测序 |
| 2.1.6 测序数据分析及存贮 |
| 2.1.7 群体及SNPs检测 |
| 2.1.8 群体遗传距离分析 |
| 2.1.9 群体遗传分化 |
| 2.1.10 群体遗传结构分析 |
| 2.1.11 群体迁移分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 测序数据分析结果 |
| 2.2.2 SNPs的数量和频率分布 |
| 2.2.3 金华猪与其它群体间的遗传距离 |
| 2.2.4 群体间遗传分化结果 |
| 2.2.5 群体遗传结构结果 |
| 2.2.6 群体迁移分析 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 金华猪的基因组测序及遗传变异检测 |
| 2.3.2 金华猪在遗传资源分类的地位 |
| 2.4 小结 |
| 3 金华猪的分子种质特性研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 基因组结构分析 |
| 3.1.2 基因组功能分析 |
| 3.1.3 金华猪群体内选择信号检测 |
| 3.1.4 群体间选择信号检测 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 SNPs在基因组上的分布 |
| 3.2.2 群体单倍型块构建 |
| 3.2.3 群体ROH分布 |
| 3.2.4 金华猪群体内选择信号分析 |
| 3.2.5 群体间选择信号分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 基因组结构上的分析 |
| 3.3.2 选择信号分析 |
| 3.4 小结 |
| 4 金华猪易感猪支原体肺炎遗传机制的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 生物信息学挖掘方法 |
| 4.1.2 全基因组关联分析 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 生物信息学挖掘结果 |
| 4.2.2 全基因组关联分析结果 |
| 4.2.3 候选基因的验证 |
| 4.3 小结 |
| 5 金华猪保种效果分析 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 基于系谱的近交系数计算 |
| 5.1.2 繁殖性能育种值评估 |
| 5.1.3 在群金华猪近交系数、亲缘系数计算和群体结构分析 |
| 5.1.4 在群金华猪群体有效含量估计 |
| 5.1.5 群体遗传多样性分析 |
| 5.1.6 遗传近交程度估计 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 金华猪历年近交系数变化 |
| 5.2.2 金华猪历年繁殖性能变化 |
| 5.2.3 在群金华猪近交系数、亲缘系数和群体结构 |
| 5.2.4 在群金华猪群体有效含量 |
| 5.2.5 群体遗传多样性分析结果 |
| 5.2.6 群体近交程度估计 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 6 金华猪的最宜杂交配套模式 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 杂种优势预测方法 |
| 6.1.2 配合力测定试验方法 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 杂种优势预测结果 |
| 6.2.2 配合力测定试验结果 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 杂种优势预测 |
| 6.3.2 配合力测定试验 |
| 6.4 小结 |
| 7 结语 |
| 7.1 具体工作及结果 |
| 7.2 论文创新点 |
| 7.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1 论文中的附表 |
| 附录2 论文中其它附件 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间取得的主要成果 |
| 学术论文 |
| 专利 |
（3）猪肺炎支原体ES-2株的特性研究及猪链球2型菌荚膜多糖合成相关基因的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表(Abbreviation) |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 猪肺炎支原体研究进展 |
| 1.2 猪肺炎支原体的病原学研究 |
| 1.3 猪肺炎支原体的致病机制 |
| 1.3.1 猪肺炎支原体在呼吸道的增殖 |
| 1.3.2 猪肺炎支原体与宿主的相互作用 |
| 1.3.3 猪肺炎支原体引起的临床症状和肺部病变 |
| 1.4 猪肺炎支原体的流行病学调查 |
| 1.5 预防和治疗猪肺炎支原体的感染 |
| 1.5.1 疫苗预防 |
| 1.5.2 抗生素治疗 |
| 1.6 猪肺炎支原体的诊断方法 |
| 1.7 猪肺炎支原体菌株的多样性 |
| 1.8 小结与展望 |
| 第二章 M.hyopneumoniae ES-2 株的分离培养及致病性研究 |
| 2.1 研究的目的与意义 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 菌株来源 |
| 2.2.2 病料的来源 |
| 2.2.3 实验动物 |
| 2.2.4 主要试剂及试剂盒 |
| 2.2.5 培养基及抗生素溶液的配制 |
| 2.2.6 主要溶液及其配制 |
| 2.2.7 主要实验器材 |
| 2.2.8 引物 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 猪肺炎支原体的分离方法(多点采样,分别培养) |
| 2.3.2 最佳离心力的选择 |
| 2.3.3 猪肺炎支原体全基因组提取操作步骤 |
| 2.3.4 PCR产物的回收与纯化 |
| 2.3.5 猪肺炎支原体的保存和复苏 |
| 2.3.6 颜色变化单位(Colour Change Unit,CCU)的测定 |
| 2.3.7 最小抑菌浓度(MIC) |
| 2.3.8 猪肺炎支原体ES-2 株的CCU与培养基pH的关系 |
| 2.3.9 猪肺炎支原体ES-2 株在不同培养基中的生长情况 |
| 2.3.10 观察猪肺炎支原体ES-2 株形态及测量其直径 |
| 2.3.11 猪肺炎支原体ES-2 株菌落形态 |
| 2.3.12 ELISA操作步骤 |
| 2.3.13 猪肺炎支原体ES-2 株的毒力评估实验 |
| 2.3.14 攻毒后观察临床信号 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 临床样品的选择及处理方法 |
| 2.4.2 M.hyopneumoniae ES-2 株的分离和鉴定 |
| 2.4.3 M.hyopneumoniae ES-2 株的形态特征 |
| 2.4.4 选择M.hyopneumoniae ES-2 株生长的最佳培养基 |
| 2.4.5 不同转接量对M.hyopneumoniae ES-2 株生长的影响 |
| 2.4.6 M.hyopneumoniae ES-2 株的生长特性与pH的对应关系 |
| 2.4.7 通过时间、pH及颜色变化定量液体培养基中的M.hyopneumoniae ES-2 |
| 2.4.8 临床常用药物对M.hyopneumoniaeES-2 株的最小抑菌浓度(MIC) |
| 2.4.9 M.hyopneumoniae ES-2 株在固体培养基上的生长特征 |
| 2.4.10 M.hyopneumoniae ES-2 株对猪致病性的研究 |
| 2.4.11 不同感染剂量M.hyopneumoniaeES-2 株在猪肺组织中的定殖能力 |
| 2.4.12 7×10~7CCU的 M.hyopneumoniae ES-2 感染剂量可引起最严重的猪支原体肺炎 |
| 2.5 讨论 |
| 2.5.1 猪肺炎支原体的分离方法 |
| 2.5.2 最小抑菌浓度(MIC) |
| 2.5.3 猪肺炎支原体ES-2 株在改良Friis培养基中具有生长速度快且生长滴度高等优点 |
| 2.5.4 猪肺炎支原体ES-2 株是一株高致病性菌株 |
| 2.6 小结 |
| 第三章 M.hyopneumoniae ES-2 株的全基因组测序及致病性相关因子的挖掘 |
| 3.1 研究的目的与意义 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 菌株来源 |
| 3.2.2 主要实验用试剂 |
| 3.2.3 主要实验器材 |
| 3.2.4 猪肺炎支原体培养基的配制 |
| 3.2.5 主要溶液的配制 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 猪肺炎支原体ES-2 株基因组的大量提取方法 |
| 3.3.2 猪肺炎支原体ES-2 株全基因组测序 |
| 3.3.3 猪肺炎支原体ES-2 株基因组序列组装 |
| 3.3.4 猪肺炎支原体ES-2 株基因组的注释分析 |
| 3.3.5 猪肺炎支原体ES-2 株毒力相关基因比较分析 |
| 3.3.6 猪肺炎支原体基因组共线性(结构变异)分析 |
| 3.3.7 分离自不同宿主体内的162 株支原体全基因组进化树分析 |
| 3.3.8 致病性猪肺炎支原体特有基因的筛选 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 M.hyopneumoniae ES-2 株全基因组的提取 |
| 3.4.2 M.hyopneumoniae ES-2 株全基因组的测序与组装 |
| 3.4.3 比较ES-2 株与已报道9株M.hyopneumoniae基因组的基本特征 |
| 3.4.4 M.hyopneumoniae全基因组相似性分析 |
| 3.4.5 通过与VFDB毒力因子数据库比较,挖掘M.hyopneumoniaeES-2株中的毒力因子 |
| 3.4.6 对不同宿主来源支原体全基因组的进化分析 |
| 3.4.7 通过比较基因组学挖掘致病性M.hyopneumoniae的特有基因 |
| 3.5 讨论 |
| 3.5.1 M.hyopneumoniae ES-2 株全基因组的基本特征 |
| 3.5.2 猪肺炎支原体的全基因组的共线性分析及对ES-2 株毒力因子的挖掘 |
| 3.5.3 支原体的遗传进化分析及挖掘致病性猪肺炎支原体的共有基因 |
| 3.6 小结 |
| 第四章 M.hyopneumoniae ES-2 株灭活疫苗免疫保护效果的评价 |
| 4.1 研究的目的与意义 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 实验用菌株 |
| 4.2.2 实验用猪肺炎支原体疫苗 |
| 4.2.3 实验动物 |
| 4.2.4 主要试剂及试剂盒 |
| 4.2.5 培养基及抗生素溶液的配制 |
| 4.2.6 主要溶液及其配制 |
| 4.2.7 实验用器材 |
| 4.2.8 引物 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 评估M.hyopneumoniaeES-2 株灭活疫苗对猪的免疫保护实验方案 |
| 4.3.2 M.hyopneumoniae ES-2 株灭活疫苗的制备 |
| 4.3.3 猪肺炎支原体灭活疫苗的免疫接种及攻毒实验 |
| 4.3.4 猪肺组织病变评分方法 |
| 4.3.5 猪肺炎支原体血清的收集方法 |
| 4.3.6 检测免疫后猪体内抗体水平 |
| 4.3.7 HE染色及对猪肺组织气管或支气管上皮细胞纤毛观察 |
| 4.3.8 测定攻毒后猪血清及猪肺组织气管或支气管灌洗液中的抗体水平 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 攻毒前,免疫接种M.hyopneumoniaeES-2 株灭活疫苗的实验动物体内抗体水平 |
| 4.4.2 感染M.hyopneumoniae ES-2 株免疫组中实验动物体温变化 |
| 4.4.3 感染M.hyopneumoniae ES-2 株前后,免疫组和非免疫组中实验动物体重变化比较 |
| 4.4.4 感染M.hyopneumoniaeES-2 株前后,免疫组和非免疫组中实验动物咳嗽变化比较 |
| 4.4.5 M.hyopneumoniae ES-2 株在免疫组和非免疫组实验动物肺部定殖能力的比较 |
| 4.4.6 通过肺部病变比较不同剂量灭活M.hyopneumoniae ES-2 抗原对猪的免疫保护效果 |
| 4.4.7 扫描电镜观察疫苗对气管或支气管上皮细胞绒毛的保护效果 |
| 4.4.8 综合评估不同剂量灭活疫苗的保护效果 |
| 4.4.9 血液和支气管灌洗液中M.hyopneumoniae抗体的产生情况 |
| 4.5 讨论 |
| 4.5.1 免疫M.hyopneumoniae ES-2 株灭活疫苗后猪体内的抗体水平 |
| 4.5.2 免疫猪感染高致病性M.hyopneumoniae ES-2 株后的临床症状 |
| 4.5.3 M.hyopneumoniae ES-2 株灭活疫苗的保护效率 |
| 4.6 小结 |
| 第五章 猪链球2型菌荚膜多糖合成相关基因的研究 |
| 5.1 猪链球2 型菌的研究进展 |
| 5.1.1 猪链球2 型菌的流行病学调查 |
| 5.1.2 猪链球2 型菌的毒力因子 |
| 5.1.3 研究的目的与意义 |
| 5.2 实验材料 |
| 5.2.1 菌株、质粒、细胞及培养条件 |
| 5.2.2 主要试剂 |
| 5.2.3 培养基与抗生素的配制 |
| 5.2.4 主要缓冲溶液的配制 |
| 5.2.5 引物 |
| 5.2.6 实验动物 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 自杀性重组质粒的构建 |
| 5.3.2 猪链球菌2 型基因缺失突变株的构建 |
| 5.3.3 突变株和野生株的体外生长特性研究 |
| 5.3.4 透射电镜观察野生株和突变株表面的CPS |
| 5.3.5 猪链球2 型菌表面唾液酸的提取 |
| 5.3.6 RNA提取方法 |
| 5.3.7 qPCR |
| 5.3.8 测定突变株和野生株的半数致死量(LD_(50)) |
| 5.3.9 突变株和野生株SC19 在小鼠体内的组织载菌量 |
| 5.3.10 对Hep-2 细胞的黏附和侵入实验 |
| 5.3.11 抗吞噬实验 |
| 5.3.12 补体激活实验 |
| 5.4 结果与分析 |
| 5.4.1 ?cps2E、?cps2L、?cps2J和?cps2G突变株的构建及鉴定 |
| 5.4.2 通过qPCR检测基因的缺失是否影响其他基因的转录水平 |
| 5.4.3 基因cps2E,cps2L,cps2J或 cps2G的缺失对其生长的影响 |
| 5.4.4 基因cps2E,cps2L,cps2J和 cps2G的缺失对S.suis2 表面荚膜多糖的影响 |
| 5.4.5 测定突变株和野生株(半数致死量)LD_(50) |
| 5.4.6 比较突变株和野生株SC19 在小鼠体内的定殖能力 |
| 5.4.7 突变株和野生株对Hep-2 细胞黏附和侵入能力比较 |
| 5.4.8 突变株和野生株抗细胞吞噬能力的比较 |
| 5.4.9 比较补体C3b在突变株和野生株表面的沉积情况 |
| 5.5 讨论 |
| 5.5.1 四个cps基因分别缺失改变了S.suis2 SC19表面CPS结构 |
| 5.5.2 S.suis2 表面CPS缺失导致其毒力显着下降 |
| 5.6 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 发表文章 |
| 致谢 |
（4）宁波地区猪支原体肺炎（MPS）流行病学调查及临床免疫效力实验（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 上篇 文献综述 |
| 第一章 猪支原体肺炎(MPS)文献综述 |
| 1 支原体及猪肺炎支原体的发展史 |
| 2 MPS病原学研究 |
| 2.1 病原基本特性 |
| 2.2 猪支原体肺炎血清抗体变化 |
| 2.3 猪肺炎支原体致病机理 |
| 3 猪支原体肺炎诊断方法的研究进展 |
| 3.1 临床诊断 |
| 3.2 血清学诊断检测 |
| 3.3 病原学诊断方法 |
| 3.4 核酸探针检测 |
| 3.5 聚合酶链式反应(PCR) |
| 4 猪支原体肺炎临床特征 |
| 4.1 急性型 |
| 4.2 慢性型 |
| 4.3 隐性型 |
| 5 特征性病理变化 |
| 6 猪肺炎支原体病防制展望 |
| 6.1 建立健康畜禽 |
| 6.2 药物治疗 |
| 6.3 疫苗接种 |
| 参考文献 |
| 下篇 研究部分 |
| 第二章 宁波地区猪支原体肺炎流行病学调查 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 流行病特征与临床表现 |
| 2.2 病理变化 |
| 2.3 病原检测结果 |
| 2.4 血清抗体检测结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 猪支原体肺炎疫苗临床免疫效力试验 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 地点及时间 |
| 1.2 主要试剂材料 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 1.4 试验动物 |
| 1.5 肺炎支原体血清抗体检测 |
| 1.6 咳嗽症状观察及统计 |
| 1.7 PCR方法鉴定 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 猪肺炎支原体抗体阳性率变化规律 |
| 2.2 各组S/P值的变化规律及差异显着性分析 |
| 2.3 咳嗽气喘症状观察及统计分析 |
| 2.3 免疫猪剖检肺脏肉变结果 |
| 2.5 PCR病原检测结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
（5）猪气喘病的诊断及其阴性猪群的建立（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 上篇 文献综述 |
| 1、猪气喘病介绍 |
| 1.1 猪气喘病生物学特性 |
| 1.2 猪气喘病的流行病学 |
| 1.3 猪肺炎支原体的致病机理 |
| 2、猪气喘病诊断技术研究进展 |
| 2.1 特征性临床症状 |
| 2.2 特征性病理变化 |
| 2.3 病原学诊断 |
| 2.4 免疫学诊断 |
| 3、国内外控制与净化猪气喘病研究进展 |
| 3.1 欧美等国家净化的历史与现状 |
| 3.2 中国净化的历史与现状 |
| 4、气喘病诊断及净化展望 |
| 4.1 猪肺炎支原体诊断展望 |
| 4.2 猪肺炎支原体净化展望 |
| 参考文献 |
| 研究部分 |
| 第二章、猪气喘病的阳性场的鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 临床调查 |
| 2.2 实验室诊断结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 气喘病阴性群猪的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 SEW培育猪群Mhp检测结果 |
| 2.2 培育猪群Mhp抗体检测结果 |
| 2.3 培育猪肺炎支原体阴性猪生产统计表 |
| 2.4 培育猪剖检肺脏肉变结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 药物和断奶日龄选择对净化猪肺炎支原体的影响 |
| 3.2 技术条件对猪肺炎支原体净化的影响 |
| 3.3 运用程序性用药、SEW和"三点式"生产体系技术培育猪气喘病阴性群的关键点 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
（6）猪支原体肺炎活疫苗（168株）免疫为核心的猪气喘病净化技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 猪气喘病简介 |
| 2 猪气喘病净化史 |
| 2.1 欧洲各国 |
| 2.2 美国 |
| 2.3 中国 |
| 3 敏感药物 |
| 3.1 四环素类(Tetracycline antibiotics) |
| 3.2 大环内酯类(Macrolides antibiotics) |
| 3.3 双萜烯类 |
| 3.4 林可霉素 |
| 3.5 氟苯尼考 |
| 3.6 中药类 |
| 4 猪气喘病疫苗简介 |
| 4.1 猪气喘病疫苗分类 |
| 4.2 猪气喘病灭活苗 |
| 4.3 猪气喘病活疫苗 |
| 5 猪气喘病净化清洗及消毒程序 |
| 6 猪气喘病净化技术(瑞士减群法配合药物治疗) |
| 7 猪气喘病净化检测程序 |
| 7.1 阴性群检测方法 |
| 7.1.1 临床症状观察 |
| 7.1.2 肺脏病变检测 |
| 7.1.3 抗体检测 |
| 7.1.4 病原检测 |
| 7.2 猪气喘病净化后的结果判定 |
| 7.3 猪气喘病阴性群监测的未来发展 |
| 8 猪气喘病净化技术总结归纳 |
| 8.1 阴性群生产 |
| 8.2 阴性群维持 |
| 9 中国气喘病净化展望 |
| 第二章 猪支原体肺炎疫苗免疫效力比较 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验选用的疫苗种类 |
| 1.2 实验选用的猪只 |
| 1.3 攻毒用毒株 |
| 1.4 实验动物饲喂饲料 |
| 1.5 主要试剂 |
| 1.6 主要仪器 |
| 1.7 实验动物的分组 |
| 1.8 实验动物的免疫与攻毒 |
| 1.9 体液免疫指数的检测 |
| 1.10 细胞免疫指数的检测 |
| 1.10.1 淋巴细胞增殖实验 |
| 1.10.2 T淋巴细胞分类计数 |
| 1.11 黏膜抗体检测 |
| 1.12 攻毒 |
| 1.13 日增重的计算 |
| 1.14 屠宰后剖检及病理变化 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 免疫抗体IgG检测结果 |
| 2.2 细胞免疫指数的检测结果 |
| 2.2.1 淋巴细胞增殖实验 |
| 2.4 攻毒后剖检记录肺部及评分 |
| 2.5 日增重的计算(kg) |
| 3 讨论 |
| 第三章 猪支原体肺炎活疫苗(168株)的临床效果评价 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 猪场背景 |
| 1.2 免疫程序的制定和实施 |
| 1.3 临床症状观察和统计 |
| 1.4 平均咳嗽指数统计 |
| 1.5 肺脏肉变统计 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 临床症状观察与统计 |
| 2.2 猪气喘病发病率统计 |
| 2.3 平均咳嗽指数统计 |
| 2.4 肺脏肉变评分统计 |
| 2.5 分析 |
| 3 讨论 |
| 第四章 猪支原体肺炎活疫苗(168株)免疫为核心的猪气喘病净化初探 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 主要试剂 |
| 1.1.2 主要仪器 |
| 1.2 猪场主要情况 |
| 1.3 净化程序 |
| 1.4 临床症状观察 |
| 1.5 子代猪肺脏肉眼病变观察 |
| 1.6 平均咳嗽指数统计 |
| 1.7 子代猪血清抗体检测 |
| 1.8 鼻拭子样品采集 |
| 1.9 鼻拭子SIgA检测 |
| 1.10 鼻拭子荧光定量PCR检测 |
| 1.11 猪肺炎支原体病原鉴定分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 临床症状 |
| 2.2 肉眼病变 |
| 2.3 平均咳嗽指数 |
| 2.4 血清学检测 |
| 2.5 SIgA检测 |
| 2.6 猪肺炎支原体荧光定量PCR检测 |
| 2.7 猪肺炎支原体鉴定结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 总结 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（7）猪支原体肺炎净化研究进展（论文提纲范文）
| 1 猪支原体肺炎净化史 |
| 1.1 欧洲各国 |
| 1.2 美国 |
| 1.3 中国 |
| 2 猪支原体肺炎净化技术总结归纳 |
| 2.1 阴性群生产 |
| 2.2 阴性群维持 |
| 2.2.1 科学的饲养管理体系 |
| 2.2.2 药物控制 |
| 2.2.3 疫苗免疫 |
| 3 中国猪支原体肺炎净化展望 |
（9）猪肺炎支原体净化检测程序研究进展（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 阴性群检测方法 |
| 1.1 临床症状观察 |
| 1.2 肉眼病变检测 |
| 1.3 抗体检测 |
| 1.3.1 血清抗体检测大多数猪场在实施气喘病净化程序时都会进行血清抗体监测。 |
| 1.3.2 初乳中抗体检测除了血清抗体之外, 初乳中的抗体检测也开始作为猪气喘病净化的检测指标。 |
| 1.3.3 鼻拭子SIgA检测Feng等[15]建立了一个猪肺炎支原体可溶性IgA (SIgA) ELISA检测方法。 |
| 1.4 病原检测 |
| 1.4.1 鼻拭子检测鼻拭子的检测是猪肺炎支原体检测 |
| 1.4.2 咽、气管/支气管检测咽、气管/支气管拭子样本 |
| 1.4.3 支气管肺泡灌洗液支气管灌洗液的检测主要用于剖解的肺脏, 这种方法需要屠宰猪, 成本较高。 |
| 1.5 气溶胶检测 |
| 2 猪气喘病净化成功与否的判定程序 |
| 2.1 简化检测程序 |
| 2.2 通用检测程序 |
| 2.3 已知Mhp阴性猪混群后辅助检测 |
| 3 猪肺炎支原体阴性群检测标准的发展趋势 |
| 4 小结 |
（10）以疫苗免疫为核心的猪气喘病控制与净化技术（论文提纲范文）
| 1 猪气喘病控制和净化技术四层次 |
| 1.1 种猪净化与环境控制 |
| 1.2 通过免疫可以净化猪气喘病 |
| 1.3 常用的药物组合及投药策略 |
| 2 灭活疫苗和Mhp168活疫苗评价 |
| 2.1 灭活苗有明显效果但仍须改进 |
| 2.2 猪支原体肺炎活疫苗 (168株) 免疫效果显着 |
| 3 我国气喘病防控和净化建议 |
| 4 总结 |
四、种猪场猪支原体肺炎(气喘病)控制与净化技术研究（论文参考文献）
- [1]感染肺炎支原体姜曲海猪肺组织差异表达circRNAs的筛选与分析[J]. 倪黎纲,赵旭庭,王宵燕,徐盼,甘源,金文. 中国畜牧兽医, 2021(06)
- [2]基于基因组信息对金华猪种质特性及其保护、利用的研究[D]. 徐忠. 上海交通大学, 2020
- [3]猪肺炎支原体ES-2株的特性研究及猪链球2型菌荚膜多糖合成相关基因的研究[D]. 张焱焱. 华中农业大学, 2019
- [4]宁波地区猪支原体肺炎（MPS）流行病学调查及临床免疫效力实验[D]. 李宗昌. 南京农业大学, 2016(07)
- [5]猪气喘病的诊断及其阴性猪群的建立[D]. 甘源. 南京农业大学, 2015(06)
- [6]猪支原体肺炎活疫苗（168株）免疫为核心的猪气喘病净化技术研究[D]. 陈财. 扬州大学, 2015(05)
- [7]猪支原体肺炎净化研究进展[J]. 陈财,华利忠,甘源,徐飞扬,袁厅,吴猛,吴其亮,高昆,邵国青. 中国动物保健, 2014(11)
- [8]重视猪支原体肺炎的免疫[J]. 谢林,邵国青,何玉友,曲向阳,徐苏标,朱连德,王爱国. 今日养猪业, 2014(04)
- [9]猪肺炎支原体净化检测程序研究进展[J]. 华利忠,冯志新,武昱孜,刘茂军,邵国青. 中国农学通报, 2012(35)
- [10]以疫苗免疫为核心的猪气喘病控制与净化技术[J]. 华利忠,邵国青,周勇岐. 中国兽药杂志, 2012(07)
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