一、乌鲁木齐奶牛“两病”检疫情况分析及对策(论文文献综述)
任瑞雪[1](2021)在《海南两个奶牛场主要疫病流行情况调查》文中认为
刘亚涛,施远翔,米吉提,颜成旭,肖开提,范冰洁,马力克·艾则孜,闫昊,马站,张斐[2](2021)在《新疆主要人畜共患病及非强制免疫类动物疫病防控现状及对策》文中研究说明通过汇总2016-2020年新疆动物防疫工作调研情况和动物疫病的监测情况,分析得出新疆主要人畜共患病及非强制免疫类动物疫病呈现出疫病种类繁多,造成的损失巨大的特点。其中细菌病布鲁氏菌病仍处于多发态势,防控难度较大;牛结核病在新疆各地均有感染点,呈现出点多面广的特点,又以东疆感染率较高;其他病原菌主要是产气荚膜梭菌、巴氏杆菌、大肠杆菌等,而产气荚膜梭菌病近2年呈多发趋势。寄生虫病中包虫病畜间阳性率仍然呈现缓慢增长的趋势;羊痒螨病发病率在南疆有上升趋势。病毒病中山羊痘在南疆呈现多发的趋势。基于以上现状,新疆主要人畜共患病及非强制免疫类动物疫病防控面临的主要问题有:政策长期关注度不够,防控力量投入少,社会认知度低;疫病防控技术服务体系建设相对滞后;部分地区畜牧业生产方式仍然落后;流通监管环节仍存漏洞;非强制免疫类动物疫病的免疫效果参差不齐等方面的主要问题。本文针对以上问题提出了切合实际的意见建议和防控对策。
张哲[3](2020)在《新疆部分地区牛副结核病流行病学调查及抗体ELISA检测方法研究》文中研究表明牛副结核病是由副结核分支杆菌(Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis,MAP)引起的慢性增生性肠炎,主要表现为肠道出现浆液性分泌物,伴随长期腹泻以及体况不良,有时危及病畜生命,使畜牧业遭受经济损失。国外是强制通报的传染病,我国定为二类动物疫病。新疆地区牛场时有该病发生,但存在临床与其他疾病易混淆,难于鉴别诊断的问题。本项研究对新疆不同地区牛场血清进行抗体检测,对临床疑似病例进行分子生物学诊断,探索建立该病的血清学ELISA检测方法,为该病的诊断和防控提供技术支持。目的:调查新疆不同地区牛场牛副结核病血清抗体阳性情况,利用分子生物学方法诊断牛副结核病疑似病例,掌握临床该病流行和发病情况;筛选副结核分枝杆菌重要抗原蛋白,建立该病抗体检测的间接ELISA方法,为建立适合本地区的牛副结核病的诊断方法提供参考意见。方法:1.采集新疆石河子、沙湾、奎屯等13个地区的牛场血液样本681份进行抗体检测;2.对临床64份疑似发病牛粪便样本进行PCR法检测;3.分析牛副结核分枝杆菌重要抗原蛋白表位构建串联重组蛋白MAP3290-1595表达载体,转化大肠杆菌经IPTG诱导表达;4.通过Western Blot和间接ELISA方法验证重组蛋白MAP3290-1595反应原性;5.棋盘方阵滴定法筛选基于重组蛋白建立的间接ELISA方法最优条件。结果:1.新疆不同地区牛副结核病血清抗体平均阳性率为6.17%(42/681),不同地区存在差异;2.对临床疑似病例PCR检测阳性率81.25%(52/64),阳性基因片段经测序确定均为Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis,且7个序列同源性100%;3.成功诱导表达和纯化串联重组蛋白MAP3290-1595,浓度为0.430 mg/mL,纯度大于90%;4.Western Blot和间接ELISA方法证实重组蛋白MAP3290-1595与牛副结核阳性血清具有较好反应原性。5.初步筛选出重组蛋白建立的间接ELISA方法最优条件。结论:1.新疆不同地区牛场均存在牛副结核病感染情况,临床腹泻病牛中感染牛副结核分枝杆菌比例较高;2.成功表达牛副结核分枝杆菌串联重组蛋白MAP3290-1595,初步建立了MAP抗体间接ELISA检测方法。为该病在新疆地区诊断和防控提供基础数据。
刘思奇[4](2020)在《2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌病的血清学分析》文中研究表明布鲁氏菌病(Brucellosis)简称布病,也被称为地中海弛张热、马尔他热或波浪热,是世界上流行性较广、危害性较强、发病率较高的人畜共患传染性疾病之一。本研究旨在通过血清学检测分析2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌血清阳性率受不同地域、不同年龄、不同季节及不同养殖方式的影响,揭示其流行规律,同时分析3年间人布病和羊布病的相关性,为该地区羊布鲁氏菌病的有效防控提供可参考的理论依据。首先对2015年-2017年呼伦贝尔地区12旗县规模化羊养殖场或散养户随机采集全血并分离血清,按照呼伦贝尔市布病防控工作方案的规定用虎红平板凝集实验(RBPT)对布鲁氏菌病进行初筛,阳性血清再用试管凝集实验(SAT)进行复检的方法进行羊布鲁氏菌病检疫。在监测的3年时间内共采集不同年龄羊血清1404708份,其中RBPT阳性样品为931只,SAT阳性样品为874只,羊布病RBPT和羊布病SAT阳性符合度达到93.88%。结果显示:2015年-2017年间羊布病血清阳性率差异极显着(p<0.01),呈整体下降趋势。呼伦贝尔地区羊布病血清阳性率最高的为2015年达到0.09%(411只),其次为2016年为0.07%(335只),血清阳性率最低的是2017年为0.03%(128只)。3年间不同行政区及不同经济区羊布病血清阳性率差异均不显着(p>0.05),其中新巴尔虎左旗最高为0.21%,最低为根河市。3年间不同经济类型区羊布病血清阳性率趋势为:城区(0.19%)>牧区(0.11%)>林区(0.08%)>半农半牧区(0.05%)。3年间不同年龄羊布病血清阳性率差异显着(p<0.05),在幼体羊、亚成体羊和成体羊3种年龄羊中,成体羊的血清阳性率最高,3年间分别为0.2%,0.14%,0.05%。羊布病血清阳性数一年四季均有体现,但季节性相对明显,不同月份血清阳性数量差异极显着(p<0.01),以春、夏季尤甚,在每年的4-7月血清阳性数量最高,为5月(207只)>6月(202只)>4月(143只)>7月(116只)。在不同的饲养环境下羊布病血清阳性率差异显着(p<0.05):规模化养殖场羊布病血清阳性率明显低于散养户,分别为0.02%和0.12%。2015年-2017年间呼伦贝尔地区人布病血清阳性新增病例差异显着(p<0.05)呈整体下降趋势,2015年-2016年人布病和羊布病血清阳性新增病例趋势相同均呈下降趋势,2016年-2017年羊布病血清阳性数量持续下降,人布病血清阳性数量略有升高。通过人布病与羊布病血清阳性数量亚组分析实验得出两者具有相关性,可通过控制羊布病血清阳性数量降低人布病的血清阳性数量。针对以上调查结果,提出针对呼伦贝尔地区相应的防控措施:1.建议将S2弱毒苗全部灌服改为怀孕母羊灌服,其他羊只皮下或肌肉注射,羔羊三月龄时即免疫,全部在首免一个月后再进行一次加强免疫。2.建议在首次检测一个月后再进行一次复检。
王珊珊[5](2020)在《2019年山东省牛羊布鲁氏菌病流行病学调查及S2疫苗免疫效果评价》文中指出布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌引起的一种变态反应性人畜共患传染病。近年来,随着牛羊业的快速发展,活畜及其产品的频繁调运,人畜间布病发病率上升,防控形势严峻。开展牛羊布病流行病学调查,掌握流行现状及流行率,为布病进一步防控和净化奠定基础。过去布病检测方法单一,国标规定是用虎红平板凝集试验(RBT)进行筛选,试管凝集试验(SAT)进行确诊,近年来出现了一些快速检测方法如竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、胶体金免疫层析试验(GICA,简称胶体金)等,因此,开展快速检测方法的符合情况研究势在必行。本研究通过对不同检测方法进行比对,筛选更简单快捷的检测方法。《国家布鲁氏菌病防治计划(2016—2020年)》要求,全国布病防控实行区域化管理,共划分为三类区域,我省属于一类地区。《山东省布鲁氏菌病防控推进工作方案》(鲁牧动卫发[2018]22号)要求,青岛、威海、烟台为布病非免疫区,采取检测净化的措施,其余13市为免疫区,采取检测免疫措施。2018年我省首次大面积使用猪种布鲁氏菌S2疫苗(S2疫苗)对牛羊灌服免疫,免疫效果如何在我省还缺乏相关数据,为此本研究对疫苗免疫后的免疫效果进行了检测。本研究调查了2019年山东省牛羊布病的流行情况,旨在为山东省制定符合现阶段的布病综合防控措施提供科学合理的依据。2019年共采集山东省16个地市的474个养殖场,牛羊非免疫血清共22212份,其中219个养牛场,非免疫血清11675份;255个养羊场,非免疫血清10537份。经检测,牛布病阳性样品56份,涉及15个养殖场,个体阳性率0.48%,群体阳性率6.85%;羊布病阳性样品9份,涉及3个养殖场,个体阳性率0.09%,群体阳性率1.18%。经分析,牛羊布病阳性样品来源7个市,共18个养殖场。从空间上看,主要分布在鲁西、鲁中地区;从季节上看,牛羊布病在春季为发病高峰;从群体看,牛布病多发于存栏量100-500头的小规模养殖场,羊布病在存栏量大于100的规模养殖场中均有存在。布病常用的血清学检测方法无论是敏感性和特异性,还是操作简便、易行和快速等方面都存在一定差异。本研究通过对四种血清学方法RBT、SAT、cELISA和胶体金进行比较,分析四种检测方法的敏感性、特异性以及符合率,筛选更适用的血清学检测方法。采用四种检测方法分别对648份牛羊血清(其中牛血清328份,羊血清320份)进行检测。结果表明SAT、RBT、cELISA和胶体金四种布病血清学检测方法符合率较高(85%90%)。胶体金特异性略低,但操作方便快捷,可用在调运过程中的现场检测;cELISA敏感性最高,实验室操作简易,可用在布病的防控、净化中实验室检测。为评价牛羊免疫S2疫苗后免疫效果,本研究采用胶体金、RBT、cELISA三种方法,对奶牛、绵羊免疫S2疫苗后的转阳率进行检测,分别在免疫后第7天、15天、30天、60天、90天、150天、180天,进行跟踪监测。结果表明奶牛、绵羊免疫S2疫苗后均能在第7天检测到布病抗体;奶牛免疫后第15天抗体转阳率最高,绵羊免疫后第30天抗体转阳率最高;此后逐渐下降,在免疫150天后抗体转阳率均低于10%;在免疫180天后绵羊全部转阴,奶牛仅2%尚未转阴。同时检测免疫后血清中IFN-γ和IL-10含量变化,S2疫苗试验组血清中IL-10、IFN-γ的含量比对照组略有所增加,并且随免疫时间延长而变化;奶牛、绵羊试验组在免疫后第15至30天血清中IFN-γ的含量显着高于对照组(P<0.05),S2疫苗能刺激奶牛、绵羊产生抗布鲁氏菌的IFN-γ。综上所述本研究掌握了2019年山东省牛羊布病个体阳性率、群体阳性率,以及在空间、时间和群体上的分布;明确了SAT、RBT、cELISA和胶体金四种布病检测方法敏感性、特异性以及符合率;摸清奶牛、绵羊灌服S2疫苗后不同时间点抗体转阳率,以及S2疫苗免疫一年后可以进行检测淘汰。
齐姗姗[6](2019)在《乌鲁木齐县奶牛布鲁氏菌病流行病学调查》文中研究说明了解并掌握2018年乌鲁木齐县奶牛布鲁氏菌病的发病流行情况,为制定布鲁氏菌病的防控策略提供数据依据。采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验对随机抽取的1 203份奶牛血样进行布鲁氏菌病检测用SPSS软件进行数据分析。阳性样品56份,阳性率为4.7%,其中牧业村、农业村和半农半牧村的平均阳性率分别为5.5%、2.7%和2.8%。经t检验,2016年、2017年、2018年的总体阳性率差异显着(P <0.05)。通过调查应加强乌鲁木齐县养殖户布病防控意识,增加布病检疫次数,改善奶牛饲养方式,由放牧饲养转变为舍饲饲养,建立养殖合作社,同时建立免疫档案,加强牲畜流通管理。
谢松松[7](2019)在《布鲁菌病动力学模型的构建及滤泡辅助性T(Tfh)细胞在布鲁菌病中的作用机制研究》文中研究指明目的:构建布鲁菌病动力学模型,从疾病的传播机理方面来反映流行规律,估算出新疆六个布鲁菌病高发区的疾病传播的严重程度,提出降低该病发病率的措施及建议。分析急、慢性布鲁菌病患者的临床特征,研究其外周血中IL-21、IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-10、滤泡辅助性T(Follicular Helper T Cells,Tfh)细胞和B细胞的表达以及抗体的水平,结合布鲁菌感染小鼠模型,进一步分析布鲁菌感染后,随时间的变化,IL-21对IL-6、IL-10、Tfh细胞、B细胞和生发中心的调节作用,分析IL-21,Tfh细胞、B细胞和抗体滴度的相关性,探讨Tfh细胞及其分泌的细胞因子IL-21在布鲁菌病中发挥免疫调节作用的机制。方法:1)分析新疆地区2008年至2017年十年间的布鲁菌病发病情况,绘制各地州发病率热图及变化趋势图;利用新疆布鲁菌病六个高发区(昌吉回族自治州、博尔塔拉蒙古自治州、巴音郭楞蒙古自治州、伊犁哈萨克自治州、塔城地区和阿勒泰地区)的数据构建布鲁菌病动力学模型及计算基本再生数,估算出新疆六个布鲁菌病高发区的疾病传播的严重程度。绘制关于牛羊免疫率和阳性牛羊屠杀率的等高线图,提出降低布鲁菌病发病的定量防治策略。2)选取新疆医科大学第一附属医院及石河子大学医学院第一附属医院2017年1月至2018年12月确诊为布鲁菌病的患者98例,其中急性期患者50例,慢性期患者48例。同时收集年龄、性别与之相匹配的健康对照者40例。所有患者均在入院后采集基本资料并完善血液生化及超声等常规检测。采用微量样本多重蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)方法检测IL-21、IFN-γ、IL-4、IL-6和IL-10的表达水平。采用密度梯度离心法从急性、慢性布鲁菌病患者和健康对照者的外周血液中分离获取外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclearcells,PBMCs),采用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测外周血中Tfh和B细胞的比例;采用试管凝集实验(Serum tube Agglutination Test,SAT)测定各组患者抗体的滴度;对急、慢性布鲁菌病患者Tfh细胞、IL-21、B细胞的表达和抗体滴度行相关性分析。回顾性分析2012年1月至2018年12月新疆医科大学第一附属医院诊断为布鲁菌病合并血小板减少症的21例患者的资料。统计人口学特征、临床特征、实验室检查等临床资料和治疗方法、预后情况。分析抗体与布鲁菌病引起的血小板减少症的严重程度的相关性。3)通过腹腔注射途径,以布鲁菌强毒株16M感染BALB/C小鼠,或联合重组小鼠IL-21蛋白(Recombinant Mouse IL-21 Protein,r IL-21)或联合重组小鼠IL-21受体(Recombinant Mouse IL-21 R Fc,r IL-21 R Fc)刺激BALB/C小鼠,在攻毒后第4周分离小鼠脾脏进行布鲁菌培养及鉴定,以验证攻毒成功;以攻毒后第2周,第4周,第8周,第12周为时间点,分别取小鼠外周血,制备血清,采用CBA方法检测IL-21、IL-6和IL-10的表达水平,采用SAT测定各组小鼠抗体的滴度;取小鼠外周全血,采用FCM检测各组小鼠Tfh和B细胞的表达水平;取小鼠肝脏、脾脏和肺脏组织,进行形态学观察和HE染色,采用免疫组织化学染色方法分析布鲁菌、花生凝集素(Peanut agglutinin,PNA)的表达。分析Tfh细胞通过分泌的IL-21对B细胞的免疫调节作用,以及对抗体分泌的影响。结果:1)根据十四地州的发病趋势,自2008年开始,各地州的发病率首先急剧上升,大部分地州在2015年左右达到了峰值(克孜勒苏和和田地区继续上升),然后疾病得到了一定的控制,开始呈现下降趋势,疫情得到了一定的缓解。建立的布鲁菌病动力学模型可反映布鲁菌病在六个地区的传播情况,根据模型计算基本再生数,新疆六个布鲁菌病高发区的基本再生数都达到了4以上,其中新疆地区布鲁菌病传播最严重的地区是阿勒泰地区,基本再生数达到了8.47(95%CI7.82-9.35),其次是巴音郭楞蒙古自治州7.84(95%CI7.12-8.60),随后为博尔塔拉蒙古自治州6.70(95%CI6.12-7.36),塔城地区6.33(95%CI5.77-6.93),昌吉回族自治州5.73(95%CI5.12-6.21),第六为伊犁哈萨克自治州4.85(95%CI4.49-5.29)。2)对入组的98例急、慢性布鲁菌病患者进行流行病学史调查,有91.8%(90/98)的患者有明确流行病学史,患者在急性期和慢性期的临床特点存在不同,急性期患者主要有发热、乏力、肌肉疼痛、关节疼痛、食纳差和多汗等症状,而慢性期患者的临床表现以关节疼痛、乏力为主。急、慢性布鲁菌病患者虎红平板凝集试验初筛均为阳性,试管凝集试验抗体滴度有差异,急性期患者的抗体滴度范围为1∶100-1∶800,慢性期患者的抗体滴度为1∶50-1∶400。IFN-γ的表达水平检测:急性期布鲁菌病患者的表达显着高于慢性期布鲁菌病患者及健康对照者,各组间比较有统计学差异(P<0.05)。IL-4的表达水平检测:慢性期布鲁菌病患者的表达高于急性期患者,且两组IL-4的表达水平均高于健康对照者,各组间比较有统计学差异(P<0.05)。IL-21的表达水平检测:急性期布鲁菌病患者的表达显着高于慢性期布鲁菌病患者及健康对照者,各组间比较有统计学差异(P<0.05)。IL-6的表达水平检测:急性期患者高于慢性期患者,两组间相比有统计学差异(P<0.05),慢性期患者高于健康对照者,但两组间比较无统计学差异(P>0.05)。IL-10的表达水平检测:慢性期高于急性期,两组相比有统计学差异(P<0.05),急性期高于健康对照者,但比较无统计学差异(P>0.05)。CD3+CD4+T细胞的表达水平:急性期患者低于健康对照者,两组之间相比有统计学差异(P<0.05),急性期患者低于慢性期患者,两组相比有统计学差异(P<0.05),慢性期患者略低于健康对照者,两组相比无统计学差异(P>0.05)。CD3+CD8+T细胞的表达水平:急性期患者高于慢性期患者,相比有统计学差异(P<0.05),慢性期患者高于健康对照者,相比无统计学差异(P>0.05)。Tfh细胞(CD3+CD4+CXCR5+细胞)的表达水平:急性期患者高于慢性期患者,慢性期患者高于健康对照者,各组间相比有统计学差异(P<0.05)。B细胞(CD3-CD19+细胞)在急、慢性布鲁菌病患者外周血中的表达检测,急性期患者高于慢性期患者,慢性期患者高于健康对照者,各组间相比有统计学差异(P<0.05)。研究结果提示,抗体滴度与IL-21的水平呈正相关;抗体滴度与Tfh细胞的水平呈正相关;抗体滴度与B细胞的水平呈正相关。2012年1月至2018年12月新疆医科大学第一附属医院收治的确诊为布鲁菌病合并血小板减少症的患者21例。患者均为男性。维吾尔族3例,汉族14例,哈萨克族4例。以农牧民为主,11例患者家中养牛、羊,有密切接触史,5例患者从事屠宰、羊毛加工行业,5例患者为不明原因感染。所有患者既往均无血小板减少病史;12例患者中血培养阳性,16例患者血清学试管凝集试验阳性,滴度1∶200~1∶800。布鲁菌病患者血小板减少的严重程度与抗体滴度无相关性。16例患者口服利福平胶囊联合多西环素片抗布鲁菌对症治疗;3例患者口服拜复乐片联合多西环素抗布鲁菌治疗,2例患者口服拜复乐片联合利福平抗布鲁菌治疗。≤10×109/L的3例患者同时给予糖皮质激素、丙种球蛋白及输注血小板治疗。治疗后随访6个月,19例患者血小板恢复正常,2例患者血小板略低于正常水平;3)在布鲁菌感染小鼠后第2周,第4周,第8周,第12周,分别取各组小鼠血清进行虎红平板实验和试管凝集试验。结果提示,实验组A、B、C虎红平板实验均为阳性;第4周,试管凝集试验滴度为1∶50,第8周是1∶200到1∶400,第12周多为1∶400。对照组试管凝集试验滴度测不出。在攻毒后4周,各实验组小鼠的肝脏和脾脏均分离到布鲁菌,攻毒成功。以攻毒后第2周,第4周,第8周,第12周为时间点检测IL-6、IL-10和IL-21的变化,检测结果提示,随时间的延长,IL-6、IL-10及IL-21的表达自第2周开始逐渐增加,第12周表达量最高。给予腹腔内注射Recombinant Mouse IL-21 Protein后的实验B组小鼠,在各时间段,IL-10,IL-21的表达较A实验组均有所上调,IL-6变化不明显;腹腔内注射Recombinant Mouse IL-21 R Fc后的实验C组小鼠,在各时间段,IL-10,IL-21的表达较A实验组均有所下降,IL-6变化不明显;提示IL-21对IL-10的分泌有促进作用,而对IL-6的分泌无明显调节作用。随攻毒时间的延长,Tfh细胞和B细胞的表达均逐渐升高,在第12周表达量最高;给予腹腔内注射Recombinant Mouse IL-21 Protein后,在各时间段,Tfh细胞和B细胞的表达较实验组A均有所上调;腹腔内注射Recombinant Mouse IL-21 R Fc后,在各时间段,Tfh细胞和B细胞的表达较实验组A均有所下降;其中IL-21对Tfh细胞和B细胞的调节作用均较明显。本研究对布鲁菌感染小鼠后,第2周,第4周,第8周,第12周的IL-21的水平,Tfh细胞的表达,B细胞的表达及其与抗体滴度进行了相关性分析,结果提示,随着攻毒时间的延长,IL-21的水平,Tfh细胞的表达,B细胞的表达均呈上升趋势,且抗体滴度升高。IL-21的水平、Tfh细胞的水平、B细胞的水平与抗体滴度呈正相关;IL-21对Tfh细胞和B细胞的表达有促进作用,同时通过脾脏PNA染色结果发现,增强IL-21后,脾脏PNA染色阳性信号增多,拮抗IL-21后,脾脏PNA染色阳性信号减少,提示Tfh细胞通过其分泌的IL-21诱导小鼠脾脏生发中心的形成。布鲁菌感染小鼠后,随着攻毒时间的延长,肝脏、脾脏和肺脏均出现不同程度的病理改变和布鲁菌染色的阳性信号。结论:1)通过传染病动力学模型分析,新疆布鲁菌病传播最严重的六个地区依次是阿勒泰地区、巴音郭楞蒙古自治州、博尔塔拉蒙古自治州、塔城地区、昌吉回族自治州、伊犁哈萨克自治州。提出通过提高牛羊的免疫率和或布鲁菌病阳性牛羊的屠杀率这两个疾病控制策略,控制人间布鲁菌病的疫情,并且计算出新疆六个布鲁菌病高发区定量控制的具体阈值;2)急性期布鲁菌病患者以促炎细胞因子IFN-γ,IL-6和IL-21的表达升高为主,其介导了宿主的炎症反应,引起各种临床表现;慢性期以抗炎细胞因子IL-4和IL-10的增高为主,其抑制炎症反应的进一步发展,致使病原体难以清除,引起全身非特异表现。急性期布鲁菌病患者以CD8+T细胞免疫为主;慢性期布鲁菌病患者的CD8+T细胞数量下降,CD4+T细胞低于正常人群,提示布鲁菌可能通过抑制宿主免疫引起慢性持续性感染。布鲁菌感染患者的急、慢性病程中,Tfh细胞、IL-21、B细胞的表达与抗体滴度呈正相关。“Tfh细胞-IL-21-B细胞-抗体”免疫调控网络参与了布鲁菌感染后的发病。抗体滴度不能作为布鲁菌病合并血小板减少严重程度的评价指标;3)布鲁菌感染实验小鼠后IL-21可促进IL-10的分泌,而对IL-6无明显促进或抑制作用。在布鲁菌感染小鼠的急性阶段,“Tfh细胞-IL-21-B细胞-抗体”共同促进感染的发生。Tfh细胞通过其分泌的IL-21发挥诱导B细胞成熟,抗体生成的作用。拮抗IL-21的功能,可降低Tfh细胞、B细胞的分泌及抗体生成,可能有利于宿主抵抗布鲁菌的感染。拮抗IL-21后,肝脏炎症程度降低。抗感染药物联合IL-21拮抗剂有望成为治疗布鲁菌病的新方案。
李坤[8](2019)在《牦牛和藏猪常见原虫调查及藏猪肺线虫线粒体基因组分析》文中提出牦牛是地理分布非常有限的偶蹄动物之一,也是高寒地区特有牛种,更是高原地区支柱产业,当地牧民的主要经济来源之一。高寒藏香猪是世界上高海拔地带比较少见的小型猪种,亦是我国珍贵的、独有的猪种。然而,寄生虫病严重威胁着牦牛、藏猪的健康,也制约着牦牛、藏猪产业的发展,某些人畜共患寄生虫,更潜在威胁着人类的健康。近年来,牦牛频发腹泻病,至今尚不清楚导致牦牛腹泻的具体病原。而寄生虫所致的动物腹泻病,占所有腹泻疾病的40%。故为摸清我国珍贵动物(牦牛、藏猪)的常见原虫流行状态;初步挖掘牦牛腹泻的寄生虫病原体;揭示牦牛、藏猪寄生虫的分子特征、挖掘潜在的药物靶基因。本研究开展了牦牛、藏猪常见原虫的血清学调查;基于高通量测序的腹泻牦牛寄生虫病原调查;牦牛、藏猪寄生虫的分子特征研究;藏猪肺线虫线粒体基因组测序和分析,研究结果如下:1.我国高原牦牛、藏猪常见原虫血清学调查通过IHA或ELISA的检测方法对在采自我国高海拔地区的四个省份(西藏、青海、四川、甘肃)的3582份牦牛血清(2011-2017),开展了牦牛七种寄生虫(弓形虫、犬新孢子虫、泰勒虫、巴贝斯虫、棘球蚴、贝诺孢子虫、住肉孢子虫)的血清学检测。应用ELISA法对2016年采自西藏地区的454份藏猪血清进行了棘球蚴血清学检测。结果表明牦牛这七种寄生虫的总体阳性率分别为25.0%、6.3%、15.1%、21.5%、6.5%、1.1%、0.9%;藏猪棘球蚴阳性率为7.3%。2.我国牦牛、藏猪五种寄生虫线粒体基因扩增及序列分析本研究以在我国西藏地区某屠宰场收集的藏猪肺线虫、结节线虫、蛔虫、包虫的包囊及在四川红原地区采集的牦牛蛔虫为主要研究对象。通过对寄生虫虫体的线粒体分子标记进行基因克隆、序列纯化、基因测序。应用生物信息学软件DNAMAN、Mega等,分别对这五种寄生虫的9种线粒体基因进行了多序列比对和进化分析。结果发现感染我国藏猪的肺线虫为复阴后圆线虫,其中米林县、林芝县及工布江达县藏猪源复阴后圆线虫与澳大利亚野猪源复阴后圆线虫(NC013813.1)同源性为97.5%-97.7%。感染藏猪的结节线虫为三种混合感染(齿食道口线虫、长尾肠结节虫、猩猩管口线虫)。其中猩猩管口线虫为首次在猪上发现。将从藏香猪胃和结肠分离的猩猩管口线虫与NCBI数据库比对发现,其与猩猩管口线虫(AJ619979.1)同源性分别为89%和90%。基于nad1、cox3和ITS三种分子标记基因,发现藏猪胃、盲肠、结肠的线虫阳性率分别为81.13%、66.04%和77.36%。藏猪蛔虫与猪蛔虫(日本、我国湛江)分离株的同源性为98.4%-99.9%,与人蛔虫(日本、巴西、我国临沭)分离株的同源性为99.4%-99.7%。藏猪包虫线粒体cox1基因与包虫G4型(AF346403.11)高度同源,说明感染藏猪的包虫为G4型。藏猪包虫线粒体atp6基因与包虫G6型(AY056613.1)同源性较高,说明感染藏猪的包虫为包虫G6型。感染牦牛的蛔虫为牛弓首蛔虫,且与牛弓首蛔虫(AJ937266.1)同源性为99.7%。3.腹泻牦牛寄生虫病原调查本研究从我国甘南地区,采集了健康成年牦牛、腹泻成年牦牛、腹泻犊牦牛的粪便样品,通过提取粪便微生物基因组DNA(g DNA)和进行18S SSU r DNA序列扩增,应用高通量测序法,全面分析了健康成年牦牛、腹泻成年牦牛、腹泻犊牦牛的粪便寄生虫的多样性与差异性。结果表明,在门水平上,健康成年牦牛、腹泻成年牦牛、腹泻犊牦牛的粪便均检测到线虫门和顶复亚门。其中三组牦牛在线虫门上,无显着差异性(p>0.05);而在顶复亚门上,腹泻犊牦牛显着高于腹泻成年牦牛(p<0.05)。在纲水平上,健康成年牦牛、腹泻成年牦牛、腹泻犊牦牛的粪便均检测到侧口纲、色矛纲和Gregarinasina(顶复亚门的一个纲),而仅有腹泻犊牦牛检测到旋毛纲和纤毛虫纲,但健康成年牦牛、腹泻成年牦牛、腹泻犊牦牛,在这5种纲水平上均未发现明显的差异(p>0.05)。在目水平上,健康成年牦牛、腹泻成年牦牛和腹泻犊牦牛的粪便均检测到前庭目、三毛滴虫目、杆线虫目和Eugregarinorida(顶复亚门的一个目),而Neogregarinorida(顶复亚门的一个目)、毛滴目和Hypotrichomonadida(鞭毛虫刚的一类寄生虫),仅在腹泻成年牦牛的粪便检测到。腹泻成年牦牛在毛滴目上,显着高于健康成年牦牛(p<0.05)和腹泻犊牦牛(p<0.05),而健康成年牦牛、腹泻成年牦牛、腹泻犊牦牛,在这其它目水平上均未发现显着的差异(p>0.05)。在科水平上,健康成年牦牛、腹泻成年牦牛和腹泻犊牦牛的粪便均检测到Simplicimonadidae(毛滴目下的一个科)和Haemonchidae(类毛样线虫上科)。而毛圆线虫科仅在健康成年牦牛和腹泻成年牦牛粪便检测到。毛滴虫科和网尾线虫科仅在腹泻成年牦牛粪便检测到。Plectidae(色矛纲下的一个科)、圆线虫科、Echinamoebidae(变形虫门下的一个科)、衣孢虫科、伪角毛虫科和Panagrolaimidae(线虫目下的一个科),仅在腹泻成年牦牛粪便检测到,且在毛滴虫科上,腹泻成年牦牛显着高于健康成年牦牛(p<0.05)和腹泻犊牦牛(p<0.05)。在属水平上,健康成年牦牛、腹泻成年牦牛和腹泻犊牦牛的粪便均检测到内变形虫属、布克斯顿纤毛虫属和血矛线虫属。而绕线属和Echinamoeba(变形虫门下的一个属),仅在腹泻成年牦牛的粪便中检测到。毛圆线虫属和锥滴虫属,在健康成年牦牛和腹泻成年牦牛的粪便均检测到,但腹泻犊牦牛的粪便未发现该虫属。簇虫属仅在腹泻犊牦牛的粪便检测出,健康成年牦牛和腹泻成年牦牛的粪便均未发现该虫属。在四毛滴虫属上,腹泻成年牦牛显着高于健康成年牦牛(p<0.05)和腹泻犊牦牛(p<0.05)。4.急性腹泻犊牦牛的寄生虫病原调查本研究从我国四川某牦牛牧区,采集了健康犊牦牛、急性腹泻犊牦牛的新鲜粪便样品。以粪便寄生虫为研究对象、以18S SSU r DNA为切入点、以高通量测序为载体,全面分析了健康犊牦牛、急性腹泻血便死亡犊牦牛的粪便寄生虫的多样性与差异性,以发掘潜在的寄生虫病原体。结果表明,在门水平上,健康犊牦牛、急性腹泻便血死亡犊牦牛的粪便均检测到顶复亚门、槽虫门、苔藓虫门,且健康犊牦牛在槽虫门上显着高于腹泻血便死亡犊牦牛(p<0.0001),而在顶复亚门上,腹泻血便死亡犊牦牛明显高于健康犊牦牛(p<0.0001)。副基体门仅在健康犊牦牛发现,而Blastocysta、变形虫门仅在腹泻血便死亡犊牦牛检出。在纲水平上,健康犊牦牛、腹泻血便死亡犊牦牛均检出Trichomonadea、Conoidasida、Phylactolaemata,而健康犊牦牛的Trichomonadea(p<0.001)和Conoidasida(p<0.0001)均显着高于腹泻血便死亡犊牦牛。Archamoebae、Aconoidasida、Blastocystidea这三纲仅在腹泻血便死亡犊牦牛粪便检出,而Hypotrichomonadea仅在健康犊牦牛检出。在目水平上,健康犊牦牛、腹泻血便死亡犊牦牛的粪便均检测到Tritrichomonadida、Eugregarinorida和Plumatellida,且Tritrichomonadida、Eugregarinorida在统计学上,健康犊牦牛明显高于腹泻血便死亡犊牦牛(p<0.0001)。Pelobiontida、Piroplasmida、Blastocystida、Adeleorina这四目仅在腹泻血便死亡犊牦牛粪便均检测到,而Hypotrichomonadida仅在健康犊牦牛检出。在科水平上,健康犊牦牛、腹泻血便死亡犊牦牛的粪便均检测到Simplicimonadidae、Gregarinidae和Plumatellidae这3科,且在统计学上,健康犊牦牛的Simplicimonadidae(p<0.0001)和Gregarinidae(p<0.01)均显着高于腹泻血便死亡犊牦牛。Entamoebidae、Theileriidae、Trichomonadidae、Blastocystidae、Cryptosporidae这5科仅在腹泻血便死亡犊牦牛检测到,而Hypotrichomonadidae仅在健康犊牦牛检出。在属水平上,健康犊牦牛、腹泻血便死亡犊牦牛的粪便均检测到Simplicimonas、Gregarina,且健康犊牦牛在这两属上均明显高于腹泻血便死亡犊牦牛,p值分<0.0001和<0.01。Entamoeba、Theileria、Tetratrichomonas、Blastocystis、Cryptosporidium这五种属仅在腹泻血便死亡犊牦牛的粪便检出,而Hypotrichomonas仅在健康组犊牦牛的粪便检测到。5.高原藏猪肺线虫线粒体基因组分析本研究通过测序,将感染藏猪的肺线虫鉴定为萨氏肺线虫(Metastrongylus salmi),并首次揭示了藏猪M.salmi线粒体基因组信息。藏香猪M.salmi的线粒体基因组大小为13722 bp,碱基AT总含量为73.54%,核酸组成为A(23.52%)、C(6.14%)、G(19.60%)、T(50.02%)、N(UCAG)(0.73%)。包含12种蛋白编码基因(cox1、cox2、cox3、nad1、nad2、nad3、nad4、nad5、nad6、nad4L、atp6、cytb),22个t RNA和2个r RNA(rrn L、rrn S),而缺少编码atp8蛋白的基因。藏香猪M.salmi线粒体基因组中的nad4L、atp6、nad2、cob、cox3、cox1、cox2、nad5基因的3‘端会紧挨着一个trn碱基序。藏香猪M.salmi线粒体基因组可翻译氨基酸4237个,其中以ATA为起始密码子的最多41.7%(5/12);以TAA或TAG为终止密码子的有11个(91.7%)。藏猪M.salmi线粒体基因使用的密码子有63种,苯丙氨酸的密码子UUU的使用频率最高,而除密码子CGC外,脯氨酸的密码子CCC的使用次数最低。综上所述本研究阐明了我国珍贵动物(牦牛、藏猪)的七种寄生虫血清流行病学特点;初步探明了牦牛腹泻的潜在寄生虫病原;确定了5种寄生虫的线粒体基因的分子特征;揭示了藏猪肺线虫线粒体基因组信息、提供了分子标记和潜在的药物靶点信息。知己(不断提高疾病的预防和治疗水平等)和知彼(全面掌握寄生虫的流行状态、分子特征等),方能有效的解决我国高原牦牛、藏猪的寄生虫疾病,为促进我国畜牧业的蓬勃发展助力,为减少人畜共患寄生虫病对牧民的危害提供理论支持。
赵玥[9](2019)在《家畜布鲁菌病试管凝集试验分光光度测量判定法的研究与应用》文中研究说明布鲁菌病是引起感染机体繁殖障碍的人畜共患病,该病的流行给畜牧业造成严重的经济损失,对养殖及其相关行业人群的人身安全造成巨大威胁。虎红平板凝集试验初筛,试管凝集试验确诊是我国基层检测机构运用最广泛的布鲁菌病检测法定方法,比浊法作为试管凝集试验结果判定方法,依靠试验人员的肉眼观测,试验结果会受到经验水平和主观偏差的影响。(1)为了更加客观地、准确地判定试管凝集试验结果,本研究首先运用酶标仪405nm、450nm、490nm、630nm四个光谱对试管凝集试验比浊管悬液进行扫描,对比分析比浊管在四个光谱扫描得出的OD值,确定最优光谱作为后续研究的统一扫描光谱。进而国标试管凝集试验方法,检测72份已知凝集效价血清,比较分光光度测量法和比浊法判定结果差异。结果显示,扫描OD值最大的光谱是405nm,且差异显着(P<0.05),线性关系决定系数R2=0.9992,可靠性最高,确定405nm光谱为后续研究的统一扫描光谱。分光光度测量法和比浊法判定72份血清效价与已知效价符合率分别为83.33%(60/72)、88.89%(64/72)(P>0.05),判定结果一致率94.44%,Kappa值0.77>0.75,表明两种方法判定结果一致性良好。分光光度测量法判定的72份样品、54份阳性样品、18份可疑样品的效价符合率比比浊法分别高出5.6%、3.7%、11.1%,并且分光光度测量法比比浊法检出可疑样品阳性数量低33.33%,表明分光光度测量法判定试管凝集试验结果能够提升待检样品效价准确性。(2)2017年--2018年,在汉台区布鲁氏菌病检测工作中运用该方法,判定虎红阳性试管凝集试验结果,保留了原始检测数据,结果客观、唯一。结果显示,2017年陕西陕西省兽医实验室检测能力对比活动中5份盲样检测结果与陕西省动物疫病预防控制中心给出的参考结果完全一致,2018年检测田间阳性样品,比浊法能明显定性的样品,经分光光度测量法判定与比浊法判定结果一致,对于比浊法判定出现多种可能性结果的样品,经分光光度法判定能得到唯一的结果。本研究从分光光度测量法判定试管凝集试验结果方法建立到在布鲁氏菌病检测工作中的运用,为分光光度测量法判定试管凝集试验结果在布鲁菌病监测工作中推广应用提供了有力的数据支持。
刘双[10](2018)在《2016~2017年乌鲁木齐县牛、羊布病流行病学调查及S2疫苗免疫效果初探》文中研究指明布鲁氏菌病简称布病,是一种人畜共患的细菌性传染性疾病,引起家畜的胎膜炎、流产、不育及各种关节炎症。人感染布鲁氏菌后需要长时间的抗生素治疗。新疆畜间布病近几年呈回升态势,并且乌鲁木齐市畜间阳性率在全疆为最高。为全面了解乌鲁木齐县所辖区域内牛、羊布病的流行情况及S2疫苗免疫抗体的消长规律,本研究2016~2017年随机选取6个乡(镇)的41个行政村散养户(10户/村/年)和19个规模养殖场为采样点,进行流行病学调查,了解布病在牛、羊间的流行情况;选取某乡2个养殖户的400只羊进行布病S2疫苗免疫,探索免疫后血清抗体的消长规律。本研究共采集牛、羊血清样品9589份,流产胎儿样品14份,收集到流行病学调查表859份。用虎红平板凝集试验(RBPT)进行初检,阳性样品用试管凝集试验(SAT)复检,并填写流行病学调查表。对采集的流产胎儿肝、脾脏样品进行聚合酶链式反应试验(PCR)检测是否感染布病。RBPT、SAT法检测结果表明:2016~2017年乌鲁木齐县总体阳性率为1.57%,牛阳性率为1.38%、羊阳性率为1.73%;散养户牛阳性率1.65%、羊阳性率2.13%;规模养殖场牛阳性率0.51%、羊阳性率1.03%;各乡(镇)之间阳性率有所不同。流行病学调查表表明:6个乡(镇)之间、散养户和规模养殖场之间在饲养动物来源、饲喂方式、种畜管理等方面均有所差异。PCR的检测结果表明:14份样品中有3份样品为羊种菌。本研究基本查清了近两年布病在乌鲁木齐县牛、羊间的流行情况,可为当地牛、羊布病的综合防治提供参考资料。在S2疫苗免疫效果初探时,对某乡2个养殖户的400只羊进行布病免疫,并对200只羊30天后加强免疫一次。在首次免疫后第15、30、60、90天进行免疫抗体转阳率监测。结果显示:只进行一次免疫时,诱导形成的免疫抗体持续时间较短,加强免疫后,90天时仍能产生较高的免疫抗体。建议对乌鲁木齐县采取以免疫接种为主的防控策略,严格引种,加强日常饲养管理与畜舍环境卫生消毒等工作。
二、乌鲁木齐奶牛“两病”检疫情况分析及对策(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、乌鲁木齐奶牛“两病”检疫情况分析及对策(论文提纲范文)
(2)新疆主要人畜共患病及非强制免疫类动物疫病防控现状及对策(论文提纲范文)
1 新疆主要人畜共患病及常见动物疫病的流行现状 |
1.1 流行现状 |
1.1.1 疫病种类 |
1.1.2 易感动物种类 |
1.1.3 不同饲养模式下的易发疾病 |
1.1.4 不同地理区域易发疾病 |
1.1.5 造成的损失 |
1.2 流行趋势 |
1.2.1 细菌病 |
1.2.1. 1 家畜布鲁氏菌病(以下简称布病) |
1.2.1. 2 牛结核病 |
1.2.1. 3 其他细菌病 |
1.2.2 寄生虫病 |
1.2.2. 1 包虫病 |
1.2.2. 2 羊痒螨病 |
1.2.2. 3 其他寄生虫病 |
1.2.3 病毒病 |
1.2.3. 1 山羊痘 |
1.2.3. 2 狂犬病 |
1.2.3. 3 其他病毒病 |
2 面临的主要问题 |
2.1 政策长期关注度不够,防控力量投入少,社会认知度低 |
2.2 疫病防控技术服务体系建设相对滞后 |
2.3 畜牧业生产方式依然落后 |
2.4 流通监管环节仍存漏洞 |
2.5 非强制免疫类动物疫病的免疫效果参差不齐 |
2.6 环境因素的影响 |
2.6.1 自然环境的影响 |
2.6.2 饲养环境的影响 |
3 防控建议及对策 |
3.1 持续提高政策关注度、防控力量的投入和社会认知度 |
3.2 强化责任落实 |
3.2.1 落实好地方政府属地管理责任 |
3.2.2 落实好部门监管责任 |
3.2.3 落实好生产经营主体防疫责任 |
3.3 加强兽医机构综合防控能力建设 |
3.3.1 加强兽医实验室建设 |
3.3.2 加强防疫队伍建设 |
3.3.3 加强动物防疫信息化建设 |
3.3.4 有序推进畜牧兽医社会化服务改革 |
3.4 推进畜禽废弃物资源化利用 |
3.5 积极推动新疆“两场”创建工作 |
3.6 加快畜牧业转型升级 |
(3)新疆部分地区牛副结核病流行病学调查及抗体ELISA检测方法研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
英文缩略表 |
第一章 文献综述 牛副结核病的研究进展 |
引言 |
1.副结核的致病机理 |
2.副结核病的危害 |
3.牛副结核病的流行现状 |
4.副结核病的临床症状 |
5.副结核病的诊断 |
5.1 皮下变态反应检测 |
5.2 细菌学检测 |
5.3 免疫试纸的快速诊断 |
5.4 分子生物学检测 |
5.5 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
5.6 琼脂扩散实验(AGID) |
5.7 补体结合实验(CFT) |
6.副结核病的防治措施 |
7.研究目的及意义 |
第二章 实验部分 |
试验一 新疆不同地区牛副结核病血清学调查 |
1.材料和方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 血清来源 |
1.1.2 检测试剂盒 |
1.1.3 主要仪器设备 |
1.2 方法 |
1.2.1 MAP的抗体检测的实验操作 |
1.2.2 阴阳性判定成立的条件 |
1.2.3 计算方法及结果判定标准: |
2.结果 |
3.讨论 |
3.1 新疆地区牛副结核病的流行情况 |
3.2 牛副结核病检测方法应用情况 |
3.3 新疆地区牛副结核病的防控措施 |
试验二 新疆部分地区疑似牛副结核病病例的PCR检测 |
1.材料与方法 |
1.1 材料 |
1.1.1 病牛的选取 |
1.1.2 粪便样本采集 |
1.1.3 引物的设计 |
1.2 方法 |
1.2.1 调查方法 |
1.2.2 诊断方法 |
1.2.3 病料采集与处理 |
1.2.4 病料中总DNA的提取 |
1.2.5 嵌套法PCR |
2.结果 |
2.1 调查病牛的临床症状 |
2.2 嵌套法PCR检测结果 |
2.3 扩增基因序列分析 |
3.讨论 |
3.1 牛副结核病临床诊断 |
3.2 PCR技术优势 |
3.3 新疆地区临床病例鉴别诊断 |
实验三 牛副结核分枝杆菌(MAP)MAP3290-1595 串联蛋白的原核表达及反应原性检测 |
1.材料和方法 |
1.1 主要试剂 |
1.2 目的基因的获取 |
1.3 载体构建及质粒鉴定 |
1.4 MAP3290-1595 蛋白的原核表达 |
1.5 MAP3290-1595 蛋白的纯化 |
1.6 MAP3290-1595 蛋白的反应原性检测 |
2.结果 |
2.1 抗原表位分析 |
2.2 重组质粒pET30a-MAP3290-1595 的鉴定结果 |
2.3 重组质粒载体pET30a-MAP3290-1595 的诱导表达 |
2.4 MAP3290-1595 蛋白纯化 |
2.5 MAP3290-1595 重组蛋白的鉴定 |
2.6 MAP3290-1595 蛋白的反应原性检测 |
2.7 牛副结核病抗体ELISA检测方法的建立 |
3.讨论 |
3.1 抗原蛋白的选取 |
3.2 原核表达体系的优点 |
3.3 ELISA检测方法的难度 |
全文总结 |
参考文献 |
作者简介 |
致谢 |
附件 |
(4)2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌病的血清学分析(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 前言 |
1.1 布鲁氏菌及布鲁氏菌病的简介 |
1.1.1 概述 |
1.1.2 布鲁氏菌的分型及分型方法 |
1.1.3 布鲁氏菌的毒力 |
1.2 布鲁氏菌病临床及病理学特征 |
1.2.1 布鲁氏菌病临床特征 |
1.2.2 布鲁氏菌病的病理学特征 |
1.3 布鲁氏菌病的诊断方法 |
1.3.1 病原分离与鉴定 |
1.3.2 血清学诊断 |
1.3.3 分子生物学诊断 |
1.4 布鲁氏菌病的流行病学特点 |
1.4.1 国外布鲁氏菌病流行学特点 |
1.4.2 国内布鲁氏菌病流行病学特点 |
1.4.3 内蒙古自治区布鲁氏菌病流行病学特点 |
1.4.4 呼伦贝尔地区布鲁氏菌病流行病学特点 |
1.5 布鲁氏菌病的主要防治方案 |
1.5.1 国外对布鲁氏菌病的防治方案 |
1.5.2 国内对布鲁氏菌病的防治方案 |
1.6 研究的目的及意义 |
2 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 调查地区及自然情况 |
2.1.2 样品采集方案及数量 |
2.1.3 检测抗原、试剂及器材 |
2.1.4 血清标准品 |
2.1.5 主要仪器设备 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 样品采集与处理 |
2.2.2 虎红平板凝集试验 |
2.2.3 试管凝集试验 |
2.2.4 统计学分析方法 |
2.2.5 人布病与羊布病亚组分析实验方法 |
3 结果 |
3.1 2015年-2017年呼伦贝尔市羊布鲁氏菌血清阳性率的时间规律 |
3.1.1 2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌血清学的监测率及阳性率 |
3.1.2 2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌血清阳性数量的季节分析 |
3.2 2015年-2017年呼伦贝尔市羊布鲁氏菌血清阳性率的地域规律 |
3.2.1 2015年-2017年呼伦贝尔市不同行政区羊布鲁氏菌血清学的监测率及阳性率 |
3.2.2 2015年-2017年呼伦贝尔市不同经济产业区羊布鲁氏菌血清学的监测率及阳性率 |
3.3 2015年-2017年呼伦贝尔市羊布鲁氏菌血清阳性率的年龄及不同养殖方式的规律 |
3.3.1 2015年-2017年呼伦贝尔市不同年龄羊布鲁氏菌血清学的监测率及阳性率 |
3.3.2 2015年-2017年呼伦贝尔市不同养殖方式羊布鲁氏菌血清学的监测率及阳性率 |
3.4 2015年-2017年呼伦贝尔地区人布病血清阳性新增病例分析 |
3.4.1 2015年-2017年呼伦贝尔地区人布病血清阳性新增病例总体分析 |
3.4.2 2015年-2017年呼伦贝尔地区不同行政区人布病血清阳性新增病例分析 |
3.4.3 2015年-2017年呼伦贝尔地区不同经济类型区人布病血清阳性新增病例分析 |
3.4.4 2015 年-2017 年呼伦贝尔地区人及羊间布病血清阳性新增病例比较分析 |
3.5 2015年-2017年呼伦贝尔地区人布病与羊布病血清阳性亚组分析实验 |
4 讨论 |
4.1 2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌的血清阳性率的特点及分析 |
4.1.1 2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌血清阳性率的时间规律分析 |
4.1.2 2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌血清阳性率的地域规律分析 |
4.1.3 2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌血清阳性率的年龄及不同养殖方式的规律分析 |
4.2 分析2015年-2017年呼伦贝尔地区布病血清阳性羊持续存在的原因 |
4.3 2015年-2017年呼伦贝尔地区人和羊布病相关性分析 |
4.4 2015-2017呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌病防控措施评价 |
4.4.1 呼伦贝尔地区的防控措施 |
4.4.2 呼伦贝尔地区防控措施的优势与不足 |
4.5 针对呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌病防控方案的建议 |
4.5.1 针对羊布病免疫监测等方面的防控建议 |
4.5.2 针对呼伦贝尔不同地区防控建议 |
5 结论 |
致谢 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
(5)2019年山东省牛羊布鲁氏菌病流行病学调查及S2疫苗免疫效果评价(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
1 前言 |
1.1 布鲁氏菌病简介 |
1.2 布鲁氏菌病流行病学 |
1.3 布鲁氏菌免疫应答机制 |
1.3.1 先天性免疫应答 |
1.3.2 获得性免疫反应 |
1.4 布鲁氏菌病检测方法概述 |
1.4.1 血清学检测 |
1.4.2 分子生物学检测(PCR) |
1.4.3 病原学检测 |
1.5 布鲁氏菌病疫苗研究 |
1.5.1 牛种布鲁氏菌19 疫苗 |
1.5.2 牛种布鲁氏菌株51疫苗 |
1.5.3 羊种布鲁氏菌Rev.1 疫苗 |
1.5.4 羊种布鲁氏菌M5 疫苗 |
1.5.5 猪种布鲁氏菌S2 疫苗 |
1.6 布鲁氏菌病综合防控措施 |
1.6.1 完善防控净化政策 |
1.6.2 科学合理饲管体系 |
1.6.3 把控好调运关口 |
1.6.4 强化消毒灭源体系 |
1.6.5 强化监测预警 |
1.6.6 严格无害化处理 |
1.6.7 加大宣传培训 |
1.6.8 加大畜场净化 |
1.7 本研究的目的及意义 |
2 材料与方法 |
2.1 牛羊流行病学调查 |
2.1.1 基线调查 |
2.1.2 材料与方法 |
2.1.3 数据处理 |
2.2 牛羊布鲁氏菌病SAT、RBT、c ELISA和胶体金四种检测方法比较 |
2.2.1 材料与方法 |
2.2.2 数据处理 |
2.3 牛羊布鲁氏菌S2 疫苗免疫效果评价 |
2.3.1 材料与方法 |
3 结果分析 |
3.1 2019 年山东省牛布鲁氏菌病流行病学调查结果 |
3.1.1 空间分布 |
3.1.2 季节分布 |
3.1.3 群体分布 |
3.2 2019 年山东省羊布鲁氏菌病流行病学调查结果 |
3.2.1 空间分布 |
3.2.2 季节分布 |
3.2.3 群体分布 |
3.3 布病SAT、RBT、cELISA和胶体金四种检测方法比较 |
3.3.1 布病四种血清学检测方法基本数据 |
3.3.2 四种检测方法检测结果的相关性 |
3.4 奶牛布鲁氏菌S2 疫苗免疫效果评价 |
3.4.1 免疫后不同时间血清抗体转阳率 |
3.4.2 .免疫后奶牛血清IFN-γ水平测定 |
3.4.3 免疫后奶牛血清IL-10 水平测定 |
3.5 绵羊布鲁氏菌S2 疫苗免疫效果评价 |
3.5.1 免疫后不同时间血清抗体转阳率 |
3.5.2 免疫后绵羊血清IFN-γ水平测定 |
3.5.3 免疫后绵羊血清IL-10 水平测定 |
4 讨论 |
4.1 2019 年山东省牛羊布鲁氏菌病流行病学调查 |
4.2 SAT、RBT、c ELISA和胶体金四种检测方法比较 |
4.3 牛羊布鲁氏菌S2 疫苗免疫效果评价 |
5 结论 |
6 参考文献 |
7 致谢 |
8 攻读硕士期间发表论文情况 |
(6)乌鲁木齐县奶牛布鲁氏菌病流行病学调查(论文提纲范文)
1 对象与材料 |
1.1 对象 |
1.2 主要材料 |
1.3 采样 |
1.4 血清的制备 |
2 方法 |
3 结果与分析 |
3.1 2018年乌鲁木齐县奶牛布病阳性率 |
3.2 2018年乌鲁木齐县不同饲养方式下的奶牛布病阳性率 |
3.3 近3年乌鲁木齐县牛布病阳性率变化趋势 |
3.4 分析 |
3.4.1 2018年乌鲁木齐县各乡、镇奶牛布病阳性率有所差异 |
3.4.2 近3年乌鲁木齐县奶牛阳性率呈上升趋势 |
4 讨论 |
4.1 提高全民防控布病意识 |
4.2 科学化养殖有待进一步推广 |
5 结论 |
(7)布鲁菌病动力学模型的构建及滤泡辅助性T(Tfh)细胞在布鲁菌病中的作用机制研究(论文提纲范文)
中英文缩略词对照表 |
摘要 |
ABSTRACT |
前言 |
第一部分 新疆布鲁菌病流行病学分析与动力学模型的建立 |
1 研究内容与方法 |
1.1 资料来源 |
1.2 研究方法 |
1.3 统计学分析软件 |
2 结果 |
3 讨论 |
4 小结 |
第二部分 Tfh细胞在急、慢性布鲁菌病患者的表达及意义 |
1 研究内容与方法 |
1.1 Tfh细胞在急、慢性布鲁菌病患者的表达及意义 |
1.2 血小板减少的21 例布鲁菌病分析 |
2 结果 |
3 讨论 |
4 小结 |
第三部分 IL-21 参与Tfh细胞对B细胞免疫调节作用的小鼠实验研究 |
1 材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 研究内容与方法 |
1.3 统计分析方法 |
2 结果 |
3 讨论 |
4 小结 |
结论 |
致谢 |
参考文献 |
综述 丝绸之路沿线国家布鲁菌病的流行特点及防控策略 |
参考文献 |
攻读博士学位期间获得的学术成果 |
个人简历 |
导师评阅表 |
(8)牦牛和藏猪常见原虫调查及藏猪肺线虫线粒体基因组分析(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩略词表(abbreviation) |
第一部分 文献综述 |
1 牦牛和藏猪概况 |
1.1 牦牛和藏猪的简介 |
1.2 牦牛和藏猪的分布 |
1.3 牦牛和藏猪的价值 |
1.4 牦牛和藏猪的养殖现状及面临的问题 |
2 牦牛的主要寄生虫病 |
2.1 牦牛球虫病 |
2.2 牦牛巴贝斯虫病和泰勒虫病 |
2.3 牦牛皮蝇蛆病 |
2.4 牦牛包虫病 |
2.5 牦牛弓形虫病 |
2.6 牦牛犬新孢子虫病 |
2.7 牦牛隐孢子虫病 |
2.8 牦牛贾第鞭毛虫病 |
2.9 牦牛微孢子虫病 |
2.10 牦牛弓首蛔虫病 |
2.11 牦牛肝片吸虫病 |
2.12 牦牛住肉孢子虫病 |
2.13 绵羊夏伯特线虫病 |
3 藏猪的主要寄生虫病 |
3.1 藏猪弓形虫病 |
3.2 藏猪肺线虫病 |
3.3 藏猪包虫病 |
3.4 藏猪蛔虫病 |
3.5 藏猪旋毛虫病 |
3.6 藏猪结节线虫病 |
3.7 藏猪疥螨病 |
3.8 藏猪鞭虫病 |
3.9 藏猪球虫病 |
3.10 藏猪棘头虫病 |
4 寄生虫病的危害 |
4.1 寄生虫病对家畜的危害 |
4.2 寄生虫病对人的危害 |
4.3 寄生虫病对畜牧产业的影响 |
5 寄生虫的主要检测方法 |
5.1 流行病学 |
5.1.1 剖检 |
5.1.2 虫卵检测 |
5.1.3 血清学检测 |
5.2 寄生虫分离鉴定 |
5.2.1 形态学鉴定 |
5.2.2 分子鉴定 |
5.3 线粒体基因组研究 |
5.4 高通量测序 |
5.5 组学研究 |
6 本研究的意义 |
第二部分 试验部分 |
第一章 牦牛、藏猪七种寄生虫疾病的血清学调查 |
1 研究背景 |
2 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 待检血清 |
2.1.2 ELISA和 IHA检测试剂盒 |
2.1.3 主要仪器设备 |
2.2 方法及结果判定 |
3 检测结果 |
3.1 牦牛弓形虫的检测结果 |
3.2 牦牛犬新孢子虫血清学检测结果 |
3.3 牦牛和藏猪棘球虫血清学检测结果 |
3.4 牦牛巴贝斯虫、泰勒虫血清学检测结果 |
3.5 牦牛贝诺孢子虫血清学检测结果 |
3.6 牦牛住肉孢子虫血清学检测结果 |
4 分析与讨论 |
4.1 弓形虫在青藏高寒地区牦牛的流行情况 |
4.2 犬新孢子虫在青藏高原部分地区的流行情况 |
4.3 棘球蚴在青藏高原部分地区的流行情况 |
4.4 巴贝斯虫和泰勒虫在青藏高原部分地区的流行情况 |
4.5 贝诺孢子虫在青藏高原部分地区的流行情况 |
4.6 住肉孢子虫在青藏高原部分地区的流行情况 |
5 总结 |
第二章 腹泻牦牛寄生虫病原调查 |
1 研究背景 |
2 材料和方法 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 实验动物 |
2.1.2 样品采集 |
2.1.3 实验仪器 |
2.1.4 试验试剂 |
2.2 方法 |
2.2.1 牦牛粪便微生物基因组DNA的提取 |
2.2.2 18S SSU rDNA V4片段扩增 |
2.2.3 PCR扩增产物电泳、回收纯化 |
2.2.4 PCR产物荧光定量、混样 |
2.2.5 高通量测序文库的构建 |
2.2.6 文库质检与测序 |
2.2.7 测序分析 |
3 结果与分析 |
3.1 基因组DNA提取结果 |
3.2 微生物18S SSU rDNA V4 区的PCR扩增结果 |
3.3 测序量与序列长度统计 |
3.4 牦牛样本Alpha多样性分析 |
3.5 Alpha多样性指数计算与差异性分析 |
3.6 不同分类水平上腹泻牦牛与健康牦牛寄生虫差异性分析 |
3.6.1 门水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
3.6.2 纲水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
3.6.3 目水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
3.6.4 科水平上比较不同组牦牛寄生虫多样性 |
3.6.5 属水平上比较不同组牦牛寄生虫多样性 |
4 分析讨论 |
第三章 急性腹泻牦牛的寄生虫病原分析 |
1 研究背景 |
2 材料和方法 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 实验动物 |
2.1.2 样品采集 |
2.1.3 实验仪器 |
2.1.4 试验试剂 |
2.2 方法 |
2.2.1 牦牛粪便微生物基因组DNA的提取 |
2.2.2 18 S SSU rDNA V4片段扩增 |
2.2.3 PCR扩增产物电泳、回收纯化 |
2.2.4 PCR产物荧光定量、混样 |
2.2.5 高通量测序文库的构建 |
2.2.6 文库质检与测序 |
2.2.7 测序分析 |
3 结果与分析 |
3.1 基因组DNA(g DNA)提取结果 |
3.2 微生物18S SSU rDNA V4 区的PCR扩增结果 |
3.3 测序量与序列长度统计 |
3.4 Alpha多样性分析 |
3.5 Alpha多样性指数计算与差异性分析 |
3.6 不同分类水平上腹泻犊牦牛与健康犊牦牛寄生虫差异性分析 |
3.6.1 门水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
3.6.2 纲水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
3.6.3 目水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
3.6.4 科水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
3.6.5 属水平上比较不同组牦牛寄生虫差异性 |
4 分析讨论 |
第四章 牦牛、藏猪五种寄生虫线粒体基因扩增及序列分析 |
1 研究背景 |
2 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.1.1 主要试剂 |
2.1.2 主要仪器设备 |
2.2 方法 |
2.2.1 虫株的收集与保存 |
2.2.2 虫株的形态学鉴定 |
2.2.3 虫体基因组DNA(g DNA)的提取 |
2.2.4 目的基因片段的扩增、电泳和切胶回收 |
2.2.5 DNA定量、基因克隆、质粒提取及测序 |
2.2.6 序列比对及进化分析 |
3 结果 |
3.1 PCR扩增结果 |
3.2 DNA定量、基因克隆、质粒提取结果 |
3.3 序列比对与进化分析 |
4 讨论 |
5 总结 |
第五章 藏猪肺线虫线粒体基因组分析 |
1 研究背景 |
2 材料与方法 |
2.1 试验材料 |
2.2 主要试剂和仪器 |
2.2.1 主要试剂 |
2.2.2 主要仪器 |
2.3 试验方法 |
2.3.1 藏猪肺线虫线粒体基因组DNA的提取 |
2.3.2 藏猪肺线虫线粒体DNA检测 |
2.3.3 肺线虫线粒体文库构建 |
2.3.4 藏猪肺线虫测序文库质量检测 |
2.4 测序 |
2.5 测序结果处理与分析 |
2.5.1 藏猪肺线虫线粒体基因组组装 |
2.5.2 藏猪肺线虫线粒体基因组注释 |
2.5.3 进化分析 |
3 试验结果 |
3.1 藏猪肺线虫线粒体DNA提取结果 |
3.2 藏猪肺线虫线粒体基因组测序数据结果 |
3.3 藏猪肺线虫线粒体基因组概况 |
3.3.1 藏猪肺线虫线粒体基因组大小估计 |
3.3.2 藏猪肺线虫线粒体基因组组装结果及评价 |
3.4 藏猪肺线虫线粒体基因组组分分析 |
3.4.1 藏猪肺线虫线粒体基因组编码/非编码基因分析 |
3.4.2 藏猪肺线虫线粒体基因组GC含量分析 |
3.4.3 藏猪肺线虫线粒体基因组密码子与氨基酸分布分析 |
3.5 藏猪肺线虫线粒体基因组功能分析 |
3.6 藏猪肺线虫线粒体基因组可视化分析 |
3.7 藏猪肺线虫线粒体基因组进化分析 |
4 分析与讨论 |
全文结论 |
参考文献 |
附录1 |
致谢 |
(9)家畜布鲁菌病试管凝集试验分光光度测量判定法的研究与应用(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
主要符号对照表 |
第一章 文献综述 |
1.1 布鲁菌病的危害 |
1.1.1 布鲁菌病对动物的危害 |
1.1.2 布鲁菌病对人健康的危害 |
1.2 布鲁菌病流行情况 |
1.2.1 国内布鲁菌病流行情况 |
1.2.2 陕西省布鲁菌病流行情况 |
1.2.3 汉中市布鲁菌病流行情况 |
1.2.4 汉台区布鲁菌病流行情况 |
1.3 布鲁菌病检测方法 |
1.3.1 病原学检测方法 |
1.3.2 血清学检测方法 |
1.4 布鲁菌病防控 |
1.5 本研究的目的与意义 |
第二章 分光光度测量法判定布鲁菌病试管凝集试验结果的研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果 |
2.2.1 比浊管OD值扫描结果 |
2.2.2 比浊管OD值线性回归结果 |
2.2.3 样品扫描结果 |
2.2.4 两种判定方法判定结果 |
2.2.5 两种判定方法判定效价与已知效价符合率 |
2.2.6 两种判定方法的一致性 |
2.3 讨论 |
第三章 分光光度测量法在田间样品布鲁菌病试管凝集试验结果判定中的应用 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 材料 |
3.1.2 方法 |
3.2 结果 |
3.2.1 陕西省2017 年兽医实验室检测能力对比活动5 份羊血清盲样检测结果 |
3.2.2 汉台区2018年6 月牛羊布鲁菌病计划监测RBT检测结果 |
3.2.3 汉台区2018年6 月布鲁菌病计划监测中经虎红平板凝集试验判定为阳性的6份奶牛血样检测结果 |
3.2.4 汉台区2018年8 月奶畜布鲁菌病普查RBT检测结果 |
3.2.5 汉台区2018年8 月奶畜布鲁菌病普查中经虎红平板凝集试验判定为阳性的12份奶牛血样检测结果 |
3.3 讨论 |
第四章 结论 |
附录 |
参考文献 |
致谢 |
个人简历 |
(10)2016~2017年乌鲁木齐县牛、羊布病流行病学调查及S2疫苗免疫效果初探(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第1章 布鲁氏菌病的研究进展 |
1.1 布病发展史 |
1.2 病原学 |
1.3 流行病学 |
1.4 临床症状 |
1.5 诊断方法 |
1.6 治疗方法 |
1.7 疫苗的应用种类及研究进展 |
第2章 2016~2017年乌鲁木齐县牛、羊布病流行病学调查 |
2.1 试验材料 |
2.2 试验方法 |
2.3 结果 |
2.4 讨论 |
第3章 S2疫苗免疫效果初探 |
3.1 试验材料 |
3.2 试验方法 |
3.3 试验结果 |
3.4 讨论 |
第4章 乌鲁木齐县牛、羊布病防控现状及建议 |
4.1 牛、羊布病防控近况和出现的问题 |
4.2 防控建议 |
全文结论 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
作者简历 |
四、乌鲁木齐奶牛“两病”检疫情况分析及对策(论文参考文献)
- [1]海南两个奶牛场主要疫病流行情况调查[D]. 任瑞雪. 新疆农业大学, 2021
- [2]新疆主要人畜共患病及非强制免疫类动物疫病防控现状及对策[J]. 刘亚涛,施远翔,米吉提,颜成旭,肖开提,范冰洁,马力克·艾则孜,闫昊,马站,张斐. 草食家畜, 2021(01)
- [3]新疆部分地区牛副结核病流行病学调查及抗体ELISA检测方法研究[D]. 张哲. 石河子大学, 2020(08)
- [4]2015年-2017年呼伦贝尔地区羊布鲁氏菌病的血清学分析[D]. 刘思奇. 东北农业大学, 2020(07)
- [5]2019年山东省牛羊布鲁氏菌病流行病学调查及S2疫苗免疫效果评价[D]. 王珊珊. 山东农业大学, 2020
- [6]乌鲁木齐县奶牛布鲁氏菌病流行病学调查[J]. 齐姗姗. 草食家畜, 2019(05)
- [7]布鲁菌病动力学模型的构建及滤泡辅助性T(Tfh)细胞在布鲁菌病中的作用机制研究[D]. 谢松松. 新疆医科大学, 2019
- [8]牦牛和藏猪常见原虫调查及藏猪肺线虫线粒体基因组分析[D]. 李坤. 华中农业大学, 2019(01)
- [9]家畜布鲁菌病试管凝集试验分光光度测量判定法的研究与应用[D]. 赵玥. 西北农林科技大学, 2019(09)
- [10]2016~2017年乌鲁木齐县牛、羊布病流行病学调查及S2疫苗免疫效果初探[D]. 刘双. 新疆农业大学, 2018(05)